???? ?? แอลฟา-ฟีโตโปรตีน?(AFP)?เป็นสารไกลโคโปรตีนที่มีคาร์ ?????โบไฮเดรตเป็นองค์ประกอบประมาณ?4?เปอร์เซ็นต์?ผลิตโดยเซลเยื่อหุ้มถุงไข่แดง?และเซลตับเป็นส่วนใหญ่?พบว่าในระยะที่เป็นตัวอ่อนและทารกหลังคลอด?6?เดือน?จะมีการผลิต?AFP ในปริมาณสูงในซีรัม?หลังจากนั้นปริมาณการผลิต?AFP?จะลดลงจนเกือบตรวจไม่พบ?แต่ผู้ป่วยเป็นมะเร็งตับจะกลับมาตรวจพบได้ใหม่ในปริมาณที่สูง?ดังนั้นการตรวจค่า?AFP?จึงเป็นประโยชน์ในการใช้ช่วยวินิจฉัยมะเร็งตับ????? เนื่องจาก?AFP?ที่พบในระยะที่เป็นตัวอ่อน?(FetalAFP, F-AFP) และป่วยเป็นมะเร็งตับ?(Hepatoma AFP, H-AFP)มีโครงสร้างบางส่วนที่เป็นคาร์โบไฮเดรตแตกต่างกัน?แต่การใช้?anti-AFP?ทั่วไปที่มีขายอยู่ในท้องตลากไม่สามารถวินิจฉัยมะเร็งตับระยะเริ่มเป็นได้?ข้อมูลเหล่านี้ทำให้เกิดข้อคิดว่าการแยก?AFP?สองกลุ่มนี้ออกจากกัน?และนำมาใช้ผลิต?anti-AFP?น่าจะได้?anti-AFP ที่มีความจำเพาะจริง?ซึ่งจะช่วยเพิ่มประสิทธิภาพในการนำมาใช้เป็นสารแอนติบอดีประกอบการผลิตชุดช่วยวินิจฉัย?เพื่อใช้ช่วยในการวินิจฉัยโรคมะเร็งตับระยะเริ่มเป็นได้?(ขณะที่ระดับ?AFP?ต่ำกว่า?200?นาโนกรัมต่อซีรัม?1?มิลลิลิตร)????? งานวิจัยนี้ได้ทำการศึกษาวิธีแยก?AFP ทั้ง?2?ชนิดังกล่าว?โดยเฉพาะ?H-AFP?จากซีรัมผู้ป่วยเป็นมะเร็งตับ?โดยอาศัยเทคนิคโครมาโทกราฟีเป็นหลัก?การเตรียมสารตัวอย่างเริ่มจากการนำซีรัมผู้ป่วยมากำจัดอัลบูมิน?โดยผ่านคอลัมน์?ซิบาครอน?บลูเจล?และโปรตีนที่มีน้ำหนักโมเลกุลสูงกว่า200,000?ดาลตัน?โดยผ่านคอลัมน์เซฟาเดกซ์?จี?200?ตามลำดับขั้นตอนดังกล่าวนี้กำจัดโปรตีนที่ไม่ต้องการได้ประมาณ?95เปอร์เซ็นต์?ของโปรตีนเริ่มต้น?และยังคงมี?AFP?เหลืออยู่31?เปอร์เซ็นต์ของ?AFP?เริ่มต้นและมีความบริสุทธิ์เพิ่มขึ้น?8.2?เท่า?การแยก?F-AFP ออกจาก?H-AFP โดยผ่านคอลัมน์คอน?เอ?เซฟาโรส?แยกสารได้เป็น?3?ส่วน?ตามทฤษฎี?ส่วนแรกเป็นส่วนที่คาดว่ามี?F-AFP?ส่วนที่?2?เป็นส่วนที่มี?AFP?ชนิดผสม?และ?lentil AFP และส่วนที่?3?เป็นส่วนที่มี?H-AFPความบริสุทธิ์ของ?AFP ทั้ง?3?ส่วน?เป็น?3.5,?14.0?และ33.4?เท่า?ตามลำดับ?ในขั้นสุดท้ายเมื่อนำส่วนที่?3?มาแยก?H-AFP โดยวิธี?anion exchange chromaatography ด้วยคอลัมน์?Mono Q HR 5/5 แยกได้?H-AFP ทั้งหมดประมาณ?13?เปอร์เซ็นต์?(ของ?AFP?เริ่มต้น)?แต่มีความบริสุทธิ์เพิ่มขึ้นเป็น?339?เท่า?H-AFP ที่แยกได้นี้ปราศจากการปนเปื้อนของอัลบูมิน?และยังคงมีคุณสมบัติความเป็นแอนติเจนที่ดีโดยสามารถกระตุ้นหนูทดลอง?ให้ผลิตแอนติบอดีต่อ?AFP ได้