| ชื่อเรื่อง | : | การโคลนและการแสดงออกของยีนกลูโคสไอโซเมอเรสจากStreptomyces sp.สายพันธุ์ 190-1 ใน Streptomyces spp. |
| นักวิจัย | : | ยุวดี ตาลาวนิช |
| คำค้น | : | STREPTOMYCES , GLUCOSE ISOMERASE , GENE CLONING |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2536 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1082536000129 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | ได้ทำการโคลนยีนกลูโคสไอโซเมอเรสจาก Streptomycessp.190-1 เข้าสู่ Streptomyces lividans TK21 โดยใช้พลาสมิดพาหะpIJ4090 คัดเลือกทรานสฟอร์แมนท์โดยอาศัยการต้านยาปฏิชีวนะไทโอสเตรพตอน และโคโลนีไฮบริไดเซชันกับดีเอ็นเอติดตามซึ่งเตรียมโดยวิธีpolymerase Chain Reaction(PCR) โดยใช้โครโมโซมอลดีเอ็นเอของStreptomyces sp.190-1เป็นแม่แบบ ที่มี 24-mer นิวคลีโอไทด์ที่สังเคราะห์ขึ้นโดยยึดตามลำดับกรดอะมิโนด้าน N-terminal ของเอนไซม์กลูโคสไอโซเมอเรสของ Streptomyces sp.190-1 และ 23-mer นิวคลีโอไทด์ที่ได้จาก conserved sequence ของยีนกลูโคสไอโซเมอเรสที่พบในจุลินทรีย์หลายชนิดเป็นไพรเมอร์ จากการคัดเลือกพบว่าดีเอ็นเอติดตามไม่มีความจำเพาะ จึงไม่สามารถนำวิธีนี้มาคัดเลือกทรานสฟอร์แมนท์ที่มียีนกลูโคสไอโซเมอเรสได้ จึงได้นำยีนกลูโคสไอโซเมอเรสที่อยู่บนพลาสมิด pUR289 ที่ประสบความสำเร็จจากการโคลนในระบบ E.coli มาโคลนย่อยโดยเชื่อมเข้ากับพลาสมิด pIJ4090 แล้วทรานสฟอร์มเข้าสู่ Streptomyces sp.190-1นำทรานสฟอร์แมนท์มาสุ่มตรวจแอคติวีตีจำเพาะของกลูโคสไอโซเมอเรสพบ1 โคลนที่ให้แอคติวีตีสูงกว่า Streptomyces sp.190-1 ซึ่งเป็นเซลล์เจ้าบ้านประมาณ 25% โดยมีแอคตีวิตีเท่ากับ 2.15 หน่วย/มก.โปรตีน ให้ชื่อว่าโคลน 19SLl และเมื่อสกัดพลาสมิดจากโคลน 19 SLl พบว่ามี 2 พลาสมิด |
| บรรณานุกรม | : |
ยุวดี ตาลาวนิช . (2536). การโคลนและการแสดงออกของยีนกลูโคสไอโซเมอเรสจากStreptomyces sp.สายพันธุ์ 190-1 ใน Streptomyces spp..
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. ยุวดี ตาลาวนิช . 2536. "การโคลนและการแสดงออกของยีนกลูโคสไอโซเมอเรสจากStreptomyces sp.สายพันธุ์ 190-1 ใน Streptomyces spp.".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. ยุวดี ตาลาวนิช . "การโคลนและการแสดงออกของยีนกลูโคสไอโซเมอเรสจากStreptomyces sp.สายพันธุ์ 190-1 ใน Streptomyces spp.."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2536. Print. ยุวดี ตาลาวนิช . การโคลนและการแสดงออกของยีนกลูโคสไอโซเมอเรสจากStreptomyces sp.สายพันธุ์ 190-1 ใน Streptomyces spp.. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2536.
|
