การศึกษาสภาวะที่เหมาะสมต่อการผลิตไซลาเนสใน shake flake flask ของ alkaliphilic ~iBacillus firmus~i K-1 ที่แยกได้จากระบบบำบัดน้ำเสียของโรงงานกระดาษบางปะอิน จังหวัดพระนครศรีอยุธยา พบว่าเปลือกข้าวโพด 1.00% เป็นแหล่งคาร์บอนที่เหมาะสมที่สุดใน การผลิตไซลาเนสเมื่อเปรียบเทียบกับรำข้าว และเศษวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตร เช่น ฟางข้าว ซังข้าวโพด และชานอ้อย เมื่อเปรียบเทียบรูปแบบของโปรตีนโดยเทคนิค SDS-PAGE พบว่า เปลือกข้าวโพดเป็นแหล่งคาร์บอนที่เหนี่ยวนำให้ ~iBacillus firmus~i K-1 ผลิตโปรตีนที่มี ขนาด 49 39 และ 33 กิโลดาลตัน เพิ่มขึ้นมากกว่าแหล่งคาร์บอนอื่น โดยโปรตีนที่ผลิตได้ อาจเป็นเอ็นไซม์ในกลุ่ม xyanolytic enzymes ซึ่งมีส่วนช่วยในการย่อยสลายไซแลนทำให้ ตรวจวัดกิจกรรมของไซลาเนสได้สูงสุด และพบว่ายูเรีย 0.40% เป็นแหล่งไนโตรเจนที่ให้ กิจกรรมของไซลาเนสสูงสุดเมื่อเปรียบเทียบกับแอมโมเนียมไนเตรท แอมโมเนียมซัลเฟต โซเดียมไนเตรท และโพแทสเซียมไนเตรท โดยไซลาเนสที่ผลิตได้ใน mineral salt medium ที่มีเปลือกข้าวโพด 1.00% เป็นแหล่งคาร์บอนและมียูเรีย 0.40% เป็นแหล่งไนโตรเจนมีกิจกรรม ของไซลาเนส 1.60 ยูนิตต่อมิลลิลิตร ส่วนการเพิ่มปริมาณแร่ธาตุในสูตรอาหารที่ใช้ เพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ พบว่า CACl(,2), FeSO(,4), MgSO(,4), MnSO(,4), CdSO(,4), CoSO(,4) และ ZnCl(,2) ไม่มีผลต่อการผลิตไซลาเนสของ ~iBacillus firmus~i K-1 การศึกษาการผลิตไซลาเนสในถังหมักขนาด 1 ลิตร ของ ~iBacillus firmus~i K-1 โดยใช้ working volume 0.50 ลิตร ที่มีเปลือกข้าวโพด 1.00% และยูเรีย 0.40% เป็นแหล่ง คาร์บอนและแหล่งไนโตรเจน ตามลำดับ พบว่าการผลิตไซลาเนสของ ~iBacillus firmus~i K-1 เกิดขึ้นพร้อมกับการเจริญ โดยกิจกรรมของไซลาเนสเพิ่มขึ้นหลังจากที่ปริมาณน้ำตาลรีดิวซ์ ในน้ำหมักลดลงในภาวะที่มีการเติมอากาศ การเพิ่มอัตราเร็วรอบในการกวนในช่วง 250 ถึง 400 rpm ทำให้จุลินทรีย์ผลิตไซลาเนสเพิ่มขึ้น ส่วนอัตราการให้อากาศพบว่าเมื่อเพิ่ม อัตราการให้อากาศจาก 0.25 ถึง 1.25 vvm อัตราการให้อากาศ 1.00 vvm เป็นอัตราการให้ อากาศที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการผลิตไซลาเนสที่อัตราการกวน 400 rpm