การวิเคราะห์ความแตกต่างทางพันธุกรรมของพยาธิใบไม้ 6 ชนิด ( Stellantchasmus falcatus , Haplorchis taichui , Centrocestus caninus , Metagonimus yakogawai Haplorchoides sp. และ Opisthorchis viverrini ) โดยเทคนิค high annealing temperature random amplification of polymorphic DNA ( HAT – RAPD ) จากการใช้ arbitary primer ความยาว 10 นิวคลีโอไทด์ จำนวน 20 primers เพื่อเพิ่มปริมาณ DNA แบบสุ่ม ซึ่งใช้ genomic DNA ของพยาธิเป็นแท่นพิมพ์ ด้วยวิธี PCR พบว่ามี 19 primers สามารถสังเคราะห์ดีเอ็นเอสายใหม่ซึ่งมีแบบแผนลายพิมพ์ที่แตกต่างกันระหว่างพยาธิ 6 ชนิดได้ และพบแถบดีเอ็นเอขนาด 382 คู่เบสในแบบแผนลายพิมพ์ดีเอ็นเอจาก primer OPA-08 (GTGACGTAGG )ซึ่งพบเฉพาะใน S. falcatus จึงนำไปหาลำดับเบส จากข้อมูลที่ได้นำไปออกแบบ specific primer 1 คู่ คือ 5' – GTGACGTAGGACCTTAAAACAG-3' และ 5' – GTGACGTAGGTAGCCCAGGTAGCGCGT - 3' ซึ่งสามารถสร้างดีเอ็นเอสายพันธุ์ใหม่เฉพาะใน S. faclcatus Genomic DNA from four heterophyid flukes ( Stellantchasmus falcatus, Haplorchis taichui, Centrocestus caninus and Metagonimus yakogawai ) and two other flukes ( Haplorchoides sp and Opisthorchis viverrin ) were amplified by the high annealing temperature random amplification of polymorphic DNA ( HAT-RAPD ) technique .Out of 20 random 10-mer oligonucleotide primers ( Operon Technologies inc. ), 19 primers produced DNA polymorphism among those genomic DNA. A unique of 382-bp band generated by the OPA08 primer ( GTGACGTAGG ) was found in HAT-RAPD pattern of S. falcatus . Subsequently, this band excised and sequenced. Based on sequence data, a pair of specific primers was designed to detect S. falcatus; 5’-GTGACGTAGGACCTTAAAACAG-3’ and 5’-GTGACGTAGGTAGCCCAGGTAGCGCGT-3’