| ชื่อเรื่อง | : | การยับยั้งการแสดงออกของยีนก่อมะเร็ง E6/E7 ในเซลล์มะเร็งปากมดลูกที่เกิดจากการติดเชื้อไวรัส HPV ด้วย RNA interference และระบบนำส่งขนาดนาโน |
| นักวิจัย | : | ณัฎฐิกา แสงกฤช |
| คำค้น | : | Chitosan , Core/shell nanoparticle , DNA delivery , Polyethyleneimine , siRNA delivery , พอลิเอทิลีนอิมมีน , ระบบนำส่งดีเอ็นเอ , ระบบนำส่งเอสไออาร์เอ็นเอ , ไคโตซาน |
| หน่วยงาน | : | สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2552 |
| อ้างอิง | : | http://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=TRG5480020 , http://research.trf.or.th/node/8833 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | งานวิจัยนี้เป็นการทดสอบประสิทธิภาพของอนุภาคนาโนประจุบวก Polyethyleneimine- Introduced Chitosan Shell/Poly (methyl Methacrylate) CoreNanoparticles (ตัวพา CS-PEI) สำหรับระบบนำส่ง siRNA โดยเบื้องต้นจะทดลองนำส่ง DNA เข้าสู่เซลล์มะเร็งปากมดลูกก่อน จากนั้นจึงนำส่ง siRNA เพื่อประเมินผลยับยั้งการแสดงออกของอองโคยีนของเชื้อ Human papillomavirus (HPV) ในเซลล์มะเร็งปากมดลูกชนิด SiHa สำหรับการตรวจสอบคุณสมบัติทาง เคมีกายภาพของตัวพา CS-PEI จะศึกษา ขนาด, ประจุ และลักษณะทางสัณฐานวิทยาเมื่อทำจับ กับ DNA และ siRNA (CS-PEI/DNA, CS-PEI/siRNA) ที่อัตราส่วนโมลของหมู่เอมีน (N) บน ตัวพา ต่อหมู่ฟอสเฟต (P) บนกรดนิวคลีอิก (N/P) ต่าง ๆ ผลที่ได้พบว่า CS-PEI/DNA และ CS-PEI/siRNA มีขนาดประมาณ 300-400 และ 400-500 นาโนเมตร โดยความเป็นประจุบวก ของ complex จะเพิ่มตามปริมาณของตัวพา CS-PEI และผลจากกล้อง Atomic force microscopy (AFM) พบลักษณะของ complex เป็นทรงกลมขนาดเล็ก มีการกระจายตัวที่ดี เมื่อ ทดสอบความสามารถในการจับกับ DNA และ siRNA โดยการทำ Gel retardation พบว่าตัวพา CS-PEI จับได้อย่างสมบูรณ์ที่อัตราส่วน N/P เท่ากับ 1.6 นอกจากนี้ตัวพาดังกล่าวให้ผลการ นำส่ง DNA เข้าสู่เซลล์สูงสุด และเมื่อใช้ตัวพา CS-PEI นำส่ง siRNA ให้ผลยับยั้งการแสดงออก ของอองโคยีน E6 และ E7 ที่เวลา 18 และ 24 ชั่วโมง จากนั้นตรวจสอบเพื่อยืนยันการเข้าสู่ เซลล์มะเร็งปากมดลูกด้วยภาพจากกล้อง differential interference contrast (DIC) confocal จากผลการทดลองที่ได้พบว่าตัวพา CS-PEI สามารถนำส่ง siRNA เพื่อกดการแสดงออกของ อองโคยีนดังกล่าวได้ We examined the potential of cationic nanoparticle – polyethyleneimineintroduced chitosan shell/poly (methyl methacrylate) core nanoparticles (CS-PEI) for siRNA delivery. Initially, DNA delivery was performed to validate the capability of CSPEI for gene delivery in the human cervical cancer cell line, SiHa. siRNA delivery were subsequently carried out to evaluate the silencing effect on targeted E6 and E7 oncogenes. Physicochemical properties including size, zeta potential and morphology of CSPEI/ DNA and CS-PEI/siRNA complexes, were analyzed. The surface charges and sizes of the complexes were observed at different N/P ratios. The hydrodynamic sizes of the CS-PEI/DNA and CS-PEI/siRNA were approximately 300–400 and 400–500 nm, respectively. Complexes were positively charged depending on the amount of added CS-PEI. AFM images revealed the mono-dispersed and spherical shapes of the complexes. Gel retardation assay confirmed that CS-PEI nanoparticles completely formed complexes with DNA and siRNA at a N/P ratio of 1.6. For DNA transfection, CSPEI provided the highest transfection result. Localization of siRNA delivered through CSPEI was confirmed by differential interference contrast (DIC) confocal imaging. The silencing effect of siRNA specific to HPV 16 E6/E7 oncogene was examined at 18 and 24 h post-transfection. The results demonstrated the capacity of CS-PEI to suppress the expression of HVP oncogenes. |
| บรรณานุกรม | : |
ณัฎฐิกา แสงกฤช . (2552). การยับยั้งการแสดงออกของยีนก่อมะเร็ง E6/E7 ในเซลล์มะเร็งปากมดลูกที่เกิดจากการติดเชื้อไวรัส HPV ด้วย RNA interference และระบบนำส่งขนาดนาโน.
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย. ณัฎฐิกา แสงกฤช . 2552. "การยับยั้งการแสดงออกของยีนก่อมะเร็ง E6/E7 ในเซลล์มะเร็งปากมดลูกที่เกิดจากการติดเชื้อไวรัส HPV ด้วย RNA interference และระบบนำส่งขนาดนาโน".
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย. ณัฎฐิกา แสงกฤช . "การยับยั้งการแสดงออกของยีนก่อมะเร็ง E6/E7 ในเซลล์มะเร็งปากมดลูกที่เกิดจากการติดเชื้อไวรัส HPV ด้วย RNA interference และระบบนำส่งขนาดนาโน."
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย, 2552. Print. ณัฎฐิกา แสงกฤช . การยับยั้งการแสดงออกของยีนก่อมะเร็ง E6/E7 ในเซลล์มะเร็งปากมดลูกที่เกิดจากการติดเชื้อไวรัส HPV ด้วย RNA interference และระบบนำส่งขนาดนาโน. กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย; 2552.
|
