| ชื่อเรื่อง | : | กลไกการทำงานของเอนไซม์ไดเซอร์ต่อการใช้อาร์เอนเอในการยับยั้งการแสดงออกของยีนในกุ้งกุลาดำ |
| นักวิจัย | : | เฉลิมพร องศ์วรโสภณ |
| คำค้น | : | กุ้งกุลาดำ , อาร์เอนเอสายคู่ , แอนติบอดี , ไวรัส |
| หน่วยงาน | : | สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2554 |
| อ้างอิง | : | http://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=RMU4980004 , http://research.trf.or.th/node/5296 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | อาร์เอนเอ อินเตอร์เฟียเรนซ์ (RNAi) มีบทบาทสำคัญในการเป็นภูมิคุ้มกันต้านการติดไวรัสในสัตว์ เอนไซม์ไดเซอร์เป็นเอนไซม์ในกลุ่มไรโบนิวคลีเอส III ซึ่งทำหน้าที่ตัดอาร์เอนเอสายคู่ให้มีขนาด 21-25 นิวคลีโอไทด์ เพื่อที่จะเข้าใจกลไกการเกิด RNAi ในกุ้ง ในการทดลองนี้จึงมีวัตถุประสงค์ในการโคลนยีนไดเซอร์ของกุ้งกุลาดำ และศึกษาบทบาทหน้าที่ของเอนไซม์ไดเซอร์ที่มีต่อขบวนการอาร์เอนเอไอในกุ้ง cDNAของไดเซอร์ถูกสกัดจากรังไข่ของแม่พันธุ์กุ้งกุลาดำ มีขนาด 7627 คู่เบส ถอดรหัสได้กรดอะมิโน 2473 ตัว ประกอบด้วย 7 โดเมน ได้แก่helicase N และ C, DUF283, PAZ, ไรโบนิวคลีเอส III จำนวน 2 บริเวณ และ dsRBD กรดอะมิโนของไดเซอร์ มีลำดับกรดอะมิโนที่มีความคล้ายคลึงกับ Dicer-1 ของ Apis mellifera (47%)ยีนไดเซอร์มีการแสดงออกในเนื้อเยื่อต่างๆ ของกุ้งกุลาดำในระดับที่แตกต่างกัน การวิเคราะห์หาโปรตีนไดเซอร์ในรังไข่กุ้งกุลาดำ โดยการทำ Western blot พบว่าโพลีโคลนอลแอนติบอดีต่อPAZ domain ของไดเซอร์ของกุ้งกุลาดำทำปฏิกิริยากับโปรตีนของรังไข่ที่มีขนาด 200 และ 220กิโลดาลตัน การแสดงออกของโปรตีนไดเซอร์มีระดับแตกต่างกันในกุ้งที่มีการพัฒนาการของรังไข่ในระยะที่ 1 ถึงระยะที่ 4 เพื่อศึกษาหน้าที่ของยีนไดเซอร์นี้ รีคอมบิแนนท์โปรตีนไดเซอร์ขนาดประมาณ 130 กิโลดาลตันซึ่งประกอบด้วย 4 โดเมนสำคัญ คือ PAZ, ribonuclease III catalytic 2 โดเมน และ dsRBD ได้ถูกผลิตในเซลล์แมลง Sf9 โดยใช้แบคูโลไวรัส (baculovirus expression system) พบว่า ไดเซอร์ถูกผลิตในปริมาณน้อยมาก ไม่สามารถนำมาทดสอบหน้าที่ของเอนไซม์นี้ได้ เป็นที่น่าสนใจว่า การแสดงออกของไดเซอร์เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติเมื่อกุ้งได้รับการฉีดด้วยอาร์เอนเอสายคู่ขนาดยาว หรือในช่วงที่กุ้งนั้นติดไวรัสที่มีอาร์เอนเอเป็นสารพันธุกรรม เช่น ไวรัสหัวเหลือง หรือ ไวรัสแหลมสิงห์ เป็นต้น จึงอาจกล่าวได้ว่ายีนนี้น่าจะมีบทบาทสำคัญในการต้านการติดไวรัสในกุ้ง |
| บรรณานุกรม | : |
เฉลิมพร องศ์วรโสภณ . (2554). กลไกการทำงานของเอนไซม์ไดเซอร์ต่อการใช้อาร์เอนเอในการยับยั้งการแสดงออกของยีนในกุ้งกุลาดำ.
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย. เฉลิมพร องศ์วรโสภณ . 2554. "กลไกการทำงานของเอนไซม์ไดเซอร์ต่อการใช้อาร์เอนเอในการยับยั้งการแสดงออกของยีนในกุ้งกุลาดำ".
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย. เฉลิมพร องศ์วรโสภณ . "กลไกการทำงานของเอนไซม์ไดเซอร์ต่อการใช้อาร์เอนเอในการยับยั้งการแสดงออกของยีนในกุ้งกุลาดำ."
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย, 2554. Print. เฉลิมพร องศ์วรโสภณ . กลไกการทำงานของเอนไซม์ไดเซอร์ต่อการใช้อาร์เอนเอในการยับยั้งการแสดงออกของยีนในกุ้งกุลาดำ. กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย; 2554.
|
