ศึกษาแอลฟา-แอล-ฟูโคซิเดส ในน้ำเชื้อสดกระบือปลัก เก็บตัวอย่างโดยใช้ช่องคลอดเทียม พบว่ามีปริมาตรเฉลี่ย 3.75 มิลลิลิตร,พีเอชเฉลี่ย 7.26,มีการเคลื่อนที่ 70 – 85%,ความเข้มข้นเฉลี่ย 1,046.7 x 106 เซลล์/มล.ตรวจหาเอนไซม์ที่เซลล์อสุจิด้วยวิธีimmunoperoxidase พบมากบริเวณอิเควทอเรียล,ส่วนท้ายอะโครโซม,และส่วนหาง สกัดโปรตีนจากอสุจิด้วย 0.2% Triton X-100 และทำ SDS-PAGE และ Western analysis เปรียบเทียบกับโปรตีนจากพลาสมาของน้ำอสุจิ พบแถบโปรตีนมีขนาดเท่ากันคือ 61 kDa และ 33 kDa ตรวจหาจำนวนไอโซฟอร์ม (isoform) ด้วยวิธี isoelectric focusing (IEF) โดยเปรียบเทียบกับโปรตีนจากเยื่อหุ้มเซลล์อสุจิที่สกัดด้วย Triton X114 phase separation และพลาสมาของน้ำอสุจิ ด้วยคอลัมน์ขนาด 40 มิลลิลิตร ที่ความต่างศักย์ 600 V,10-15 ชั่วโมง ที่ 4C วัดค่าพีเอชและตรวจหากิจกรรมของเอนไซม์ โดยใช้ 4-MU อ่านค่าด้วยฟลูออโรมิเตอร์ที่ความยาวคลื่นกระตุ้น 360 nm และความยาวคลื่นปลดปล่อย 430 nm พบว่าเอนไซม์จากเยื่อหุ้มเซลล์อสุจิที่สกัดด้วย 1% Triton X100 มีไอโซฟอร์ม 7 – 11 ไอโซฟอร์มมีค่าพีไอ 7.0, 7.1, 7.2, 7.4, 7.5 และ 7.6 มีพีคสูงสุดที่พีไอ 7.41 แอลฟา-แอล-ฟูโคซิเดส จากเยื่อหุ้มเซลล์อสุจิที่สกัดด้วย Triton X114 phase separation มี 10 – 15 ไอโซฟอร์มมีค่าพีไอ 7.2, 7.3, 7.4, 7.5 และ 7.6โดยมีพีคสูงสุดที่ค่าพีไอ 7.43 และ แอลฟา-แอล-ฟูโคซิเดส ในพลาสมาของน้ำอสุจิมี7 – 11 ไอโซฟอร์ม มีค่าพีไอ 7.0, 7.3 และ 7.4โดยมีพีคสูงสุดที่ค่าพีไอ 7.31 ทำการหาพีเอชที่เหมาะสมด้วยบัฟเฟอร์3ชนิดพบว่าแอลฟา-แอล-ฟูโคซิเดสจากเยื่อหุ้มเซลล์และพลาสมาของน้ำอสุจิ สามารถทำงานได้ดีที่พีเอช3 – 6 โดยแอลฟา-แอล-ฟูโคซิเดสจากเยื่อหุ้มเซลล์อสุจิมีกิจกรรมสูงสุดที่พีเอช 6.36 และจากพลาสมาของน้ำอสุจิที่ 6.37 โดยไม่มี buffer effect เมื่อย่อยเอนไซม์จากพลาสมาของน้ำอสุจิด้วย N-glycanaseพบว่ามีคุณสมบัติเป็น N-glycans และเมื่อย่อยด้วยนิวรามินิเดสพบว่าไอโซฟอร์มที่เป็นกรดมีจำนวนลดลงชัดเจนแสดงถึงการมีกรดเซียลิคอยู่ปลายสุด ตรวจหาขนาดเอนไซม์ด้วยวิธี Gel filtration chromatography พบว่าแอลฟา-แอล-ฟูโคซิเดสในพลาสมาของน้ำอสุจิของกระบือปลักมีน้ำหนักโมเลกุล252 kDa α-L-fucosidases are enzymes involved in the degradation of fucose containing molecules. This research is to detect and characterize α -L-fucosidases in a swamp buffalo (Bubalus bubalis L.) semen. The results showed that swamp buffalo semen had volume of 3.75 ml per ejaculation, average pH of 7.26. The sperm motility was 70 – 80% and the average concentration was 1,046.7 x 106 cell/ml. Immunocytochemical studied by immunoperoxidase showed strong staining in the equatorial bands, post acrosomal region, and tails. Sperm proteins were extracted by using 0.2%Triton X-100.The extracts were subjected to SDS/PAGE and Western analysis. The results showed that sperm and seminal fluid α -L-fucosidases migrated very close, which has Mr 61 kDa and 33 kDa. Isoelectric focusing(IEF) indicates that sperm α -L-fucosidase contains 7 – 11 isoforms (1% Triton X(100 extracts) with pIs between 6.7 – 8.0 (pIs 7.0, 7.1, 7.2, 7.4, 7.5, and 7.6) while seminal fluid α -L-fucosidase contains 7 – 10 isoforms with pIs between 6.2 – 7.6 (pIs 7.0, 7.3 and 7.4). In some experiments, the sperm extracts were subjected to Triton X-114 phase separation. The aqueous phase was put onto a semipreparative IEF column. The IEF profiles of proteins from the aqueous phase showed a similar patterns, but giving slightly more isoforms (10 – 15 isoforms). pH optimum studies showed that both sperm and seminal fluid α -L-fucosidases shows substantial activities over a broad range of pH value from 3 – 6 with highest value at 6.36 (sperm enzyme) and 6.37 (seminal fluid enzyme). N-glycanase and neuraminidase treatments indicated that the enzyme is an N-glycan and contains sialic acids. The native enzyme contains a molecular weight of about 252 kDa as indicated by gel filtration. The function of α -L-fucosidase in buffalo reproduction is still not yet known.