การตรวจวินิจฉัยการติดเชื้อร่วมจากเนื้อเยื่อที่ฝังในพาราฟินโดยใช้เทคนิค double immunohistochemistry สนทนา มิมะพันธุ์ * ทริกา จันทมณีโชติ ธีระ ศรีประสาท รุ่งอรุณ ยอดรัก ชานนท์ ฝาเงิน และลัดดา ตรงวงศา กลุ่มพยาธิวิทยา สถาบันสุขภาพสัตว์แห่งชาติ เกษตรกลาง กรุงเทพมหานคร *ผู้รับผิดชอบบทความ โทรศัพท์ 0-257-98908 โทรสาร 0- 2579-8919 Email: sontanam@dld.go.th บทคัดย่อ ในการตรวจวินิจฉัยโรค สัตว์อาจไม่ได้ป่วยจากการติดเชื้อเพียงชนิดเดียวเท่านั้น แต่มักเป็นการติดเชื้อร่วมกัน และเทคนิค immunohistochemistry (IHC) นับว่าเป็นเทคนิคทางพยาธิวิทยาที่จำเพาะเจาะจงและมีศักยภาพในการตรวจหา antigen ของเชื้อโรคได้ แต่มีข้อจำกัดคือตรวจได้เพียงครั้งละ 1 ชนิดเท่านั้น การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อนำเทคนิค double IHC มาใช้ในการตรวจวินจฉัยโรคทีมีการติดเชื้อร่วมกัน 2 ชนิด โดยเลือกทดสอบการติดเชื้อร่วมของ Escherichia coli (E. coli) และ Porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) ในเนื้อเยื่อลำไส้เล็กของลูกสุกรจำนวน 20 ตัวอย่างที่ผ่านการแช่ในฟอร์มาลินและฝังในพาราฟิน โดยใช้ primary antibody ที่จำเพาะต่อเชื้อ2ชนิด คือ E. coli K12 C600 และ PEDV strain 83P-5 การตรวจหา E. coli ทำโดยใช้ horseradish peroxidase (HRP) and 3,3-diaminobenzidine tetrahydrochloride (DAB) ในขณะที่การตรวจหา PEDV ทำโดยใช้ alkaline phosphatase (AP) และ fast red ทำหน้าที่ enzyme และ substrate-chromogen ตามลำดับ ผลการศึกษาพบว่าสามารถตรวจพบ antigen ทั้ง2ชนิดบนเนื้อเยื่อเดียวกัน จากปฏิกิริยาของ enzyme และ substrate-chromogen แต่ละคู่ที่ให้ผลเป็นสีต่างกัน โดยตำแหน่งเป้าหมายติดสีน้ำตาลและชมพูเข้มและมี background ต่ำ ดังนั้น เทคนิค double IHC นับเป็นอีกทางเลือกหนึ่งที่ได้ผลในการตรวจวินิจฉัยโรคที่มีการติดเชื้อร่วมกัน เทคนิคนี้สามารถนำไปใช้ประโยชน์ในการตรวจวินิจฉัยการติดเชื้อร่วมชนิดอื่น เช่น ไวรัส แบคทีเรีย และ ปรสิต ตลอดจนการศึกษาวิจัยทางพยาธิวิทยา คำสำคัญ: การตรวจวินิจฉัย การติดเชื้อร่วม เนื้อเยื่อที่ฝังในพาราฟิน double immunohistochemistry