(1) ออกแบบ RNAi จำนวน 3 ชุด (ลำดับนิวคลีโอไทด์แตกต่างกัน) บนยีน usp14 โดยเลือกชนิด Modified RNA duplexes (Stealth) จากฐานข้อมูล www.invitrogen.com/rnai (2) คัดเลือกเซลล์ไลน์ของมะเร็งท่อน้ำดีในคนไทย จากศูนย์วิจัยพยาธิใบไม้ตับและมะเร็งท่อน้ำดี มหาวิทยาลัยขอนแก่น (3) นำโอลิโก RNAi ทั้ง 3 ชุด เข้าเซลล์มะเร็งท่อน้ำดี (transfection) โดยใช้ฟลูโอเรสเซนท์ BLOCK-iT (Invitrogen) ในการติดตามประสิทธิภาพของการนำโอลิโก RNAi เข้าสู่เซลล์ โดยทำควบคู่ไปกับ negative control (4) เลือกโอลิโก RNAi เพียง 1 ชุด ที่มีประสิทธิภาพสูงสุดในการ knockdown ยีน usp14 (5) วิเคราะห์สภาวะของเซลล์ หลังจากถูก transfected ด้วย RNAi ในข้อ (4) ได้แก่ Proliferation Migration และ Invasion (6) นำเซลล์ไลน์ที่ถูก transfected ด้วย RNAi ในข้อ (4) ไปวิเคราะห์การยับยั้งการแสดงออกของยีน (ปริมาณ mRNA) ด้วยเทคนิค Real-time reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) (7) นำเซลล์ไลน์ที่ถูก transfected ด้วย RNAi ในข้อ (4) เป็นเวลา 48 ชั่วโมง ไปวิเคราะห์การยับยั้งการสร้างโปรตีนด้วยเทคนิค Western blotting