| ชื่อเรื่อง | : | การสร้างพลาสมิดเพื่อใช้ในการแสดงออกของยีนที่สร้างฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตเพื่อให้ผลผลิตในปริมาณมากและหลั่งออกนอกเซล |
| นักวิจัย | : | ลิลี่ เอื้อวิไลจิตร , Lily Eurwilaichitr |
| คำค้น | : | Biological sciences , BT-B-07-AM-B2-4103 , Escherichia coli , Gene expression , Genetic engineering , Microbiology , Plasmids , Saccharomyces cerevisiae , การแสดงออกของยีน , พลาสมิด , พันธุวิศวกรรม , ยีสต์ , ศูนย์พันธุวิศวกรรมและเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติ , สาขาวิศวกรรมศาสตร์และอุตสาหกรรมวิจัย |
| หน่วยงาน | : | สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2542 |
| อ้างอิง | : | http://www.nstda.or.th/thairesearch/node/2632 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | ประโยชน์อย่างหนึ่งของเชื้อยีสต์หมักขนมปัง หรือ Saccharomyces cerevisiae คือ สามารถนำมาใช้เป็นตัวผลิตโปรตีนจากสิ่งมีชีวิตอื่นๆ ที่มีคุณค่าทางเศรษฐกิจได้ ยีสต์มีความคล้ายคลึงกับ Escherchia coli ในบาง ด้าน คือการศึกษาด้านพันธุวิศวกรรมของยีสต์มีความก้าวหน้ามาก และมีการใช้เทคนิคด้านพันธุวิศวกรรม มาใช้ในการดัดแปลงและปรับปรุงต้วนำ DNA ของยีสต์เช่นเดียวกับที่ทำกับ E.coli อย่างไรก็ตาม ยีสต์มีความได้เปรียบ E.coli หลายด้าน เช่น ยีสต์มีระบบการหลั่งสารออกนอกเซลล์ และยีสต์สามารถเปลี่ยนแปลงโปรตีนที่มันสร้างขึ้นภายหลังการสังเคราะห์โปรตีน แล้ว ซึ่งระบบนี้คล้ายคลึงกับระบบในสิ่งมีชีวิตชั้นสูง แต่เราจะไม่พบระบบนี้ใน E.coli สิ่งที่จำเป็นที่สุดต่อเทคนิคการแสดงออกของยีนจากสิ่งมีชีวิตอื่นๆในยีสต์ นั้นคือ ตัวนำ DNA ของยีสต์ ถึงแม้ว่า จะมีการสร้างและปรับปรุงโครงสร้างของตัวนำ DNAของยีสต์ขึ้นมากมาย โดยที่ตัวนำDNAเหล่านี้จะประกอบ ด้วยสิ่งที่จำเป็นต่อการแสดงออกของยีนในยีสต์เช่น โปรโมเตอร์, ยีนมาร์กเกอร์ เป็นต้น แต่ตัวนำ DNAบางตัวที่ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายยังขาดปัจจัยบางอย่างที่อาจเกี่ยว พันโดยตรงกับการเพิ่มผลผลิตของโปรตีนนั้นๆ ในยีสต์ ปัจจัยเหล่านี้ได้แก่ ลำดับเบสที่มีความสำคัญต่อการหลั่งสานในยีสต์,ลำดับเบสของ 2 ไมครอน เป็นต้น โครงการนี้มีจุดประสงค์ที่จะสร้างพลาสมิดที่สามารถนำมาใช้ในการแสดงออกของ ยีนจากสิ่งมีชีวิตต่างๆในยีสต์ เพื่อใช้ในการผลิตโปรตีนที่มีคุณค่าทางกสิกรรม หรือทางการแพทย์ ในโครงการอื่นๆต่อไปในอนาคต พลาสมิดที่จะสร้างขึ้นนี้สามารถแบ่งเป็น 2 ประเภทตามชนิดของโปรโมเตอร์ คือ GAL1 โปรโมเตอร์ และ TEF1 โปรโมเตอร์พลาสมิดทั้งสองประเภทนี้จะประกอบด้วยส่วนที่เหมือนกันคือจะมีลำดับเบสที่ควบคุมการหลั่งสาร และลำดับเบสที่ช่วยให้ สามารถผลิตพลาสมิดได้หลายพลาสมิดต่อหนึ่งเซลล์ พลาสมิดที่ได้จะถูกนำมาทดลองเป็นตัวนำ DNA ของสารฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของปลาบึก เนื่องจากปลาบึกเป็นสัตว์น้ำจืดที่มีขนาดใหญ่ที่สุดในโลก และมีอัตราการเจริญเติบโตสูง ดังนั้นฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของปลาบึกจึงเป็นที่น่าสนใจที่จะนำมาใช้ใน อุตสาหกรรมการทำฟาร์มเลี้ยงปลาน้ำจืด เพื่อให้ปลาที่เลี้ยงไว้มีอัตราการเติบโตที่เร็ว ฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของปลาบึกสกัดได้จากต่อมใต้สมองส่วนหน้า แต่การที่จะสกัดฮอร์โมนออกมานั้นมีความยุ่งยากมากและปริมาณน้อยเพียง 1-4 มิลลิกรัมต่อต่อมใต้สมอง 1 กรัม ดังนั้นจึงมีการใช้ recombinant DNA technology เพื่อการแสดงออกของฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของปลาบึกใน E.coli แต่เนื่องจากผลผลิตฮอร์โมนที่ได้ไม่ละลายและสะสมใน inclusion body ซึ่งทำให้ยากต่อการทำให้บริสุทธิ์ จึงมีการใช้ยีสซึ่งสามารถสร้างสารที่หลั่งออกนอกเซลล์ได้ในโครงการนี้ เพื่อให้ได้ผลผลิตที่มีขั้นตอนในการทำให้บริสุทธิ์ที่ซับซ้อนน้อยลงและมี ปริมาณที่มากโดยโครงการนี้จะนำเอา cDNA ของฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของปลาบึกมาใส่ในพลาสมิดที่สร้างขึ้น แล้วตรวจสอบดูว่าสามารถสร้างโปรตีนนี้ได้หรือไม่ และมีระดับต่างมากน้อยเพียงใดในแต่ละพลาสมิด และสารที่สร้างขึ้นนี้มีการหลั่งออกนอกเซลล์หรือไม่ ในปริมาณเท่าไร คาดว่าพลาสมิดที่ได้เล่านี้จะสามารถนำมาใช้เป็นตัวนำ DNA ของสารต่างๆที่มีคุณค่าทางเศรษฐกิจในโครงการต่อไป เช่น การสร้างฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของมนุษย์ ซึ่งถ้าผลิตได้สำเร็จจะเป็นประโยชน์อย่างสูงทั้งในทางการแพทย์และทางเศรษฐกิจของชาติ |
| บรรณานุกรม | : |
ลิลี่ เอื้อวิไลจิตร , Lily Eurwilaichitr . (2542). การสร้างพลาสมิดเพื่อใช้ในการแสดงออกของยีนที่สร้างฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตเพื่อให้ผลผลิตในปริมาณมากและหลั่งออกนอกเซล.
ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ. ลิลี่ เอื้อวิไลจิตร , Lily Eurwilaichitr . 2542. "การสร้างพลาสมิดเพื่อใช้ในการแสดงออกของยีนที่สร้างฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตเพื่อให้ผลผลิตในปริมาณมากและหลั่งออกนอกเซล".
ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ. ลิลี่ เอื้อวิไลจิตร , Lily Eurwilaichitr . "การสร้างพลาสมิดเพื่อใช้ในการแสดงออกของยีนที่สร้างฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตเพื่อให้ผลผลิตในปริมาณมากและหลั่งออกนอกเซล."
ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ, 2542. Print. ลิลี่ เอื้อวิไลจิตร , Lily Eurwilaichitr . การสร้างพลาสมิดเพื่อใช้ในการแสดงออกของยีนที่สร้างฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตเพื่อให้ผลผลิตในปริมาณมากและหลั่งออกนอกเซล. ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ; 2542.
|
