| ชื่อเรื่อง | : | การวิเคราะห์ในระดับยีนของเชื้อ Pseudomonas sp. ที่สามารถย่อยสลายยาฆ่าแมลง Methyl Parathion |
| นักวิจัย | : | เจษฎาวรรณ วิจิตรเวชการ , Jesadawan Wichitwechkarn |
| คำค้น | : | Biochemistry , Biological sciences , Biology and biochemistry , BT-B-06-XG-16-4502 , Methylparathion , Pseudomonas sp. , ศูนย์พันธุวิศวกรรมและเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติ , สาขาเกษตรศาสตร์และชีววิทยา , เมททิลพาราไทออน , เมททิลพาราไทออนไฮโดรเลส , เมทิลพาราไธออน |
| หน่วยงาน | : | สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2547 |
| อ้างอิง | : | http://www.nstda.or.th/thairesearch/node/2359 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | งานวิจัยนี้เป็นการศึกษาในระดับโมเลกุลของเชื้อแบคทีเรียที่แยกได้จากดิน บริเวณแหล่งเกษตรกรรมในประเทศไทยซึ่งสามารถย่อยสลายและใช้เมททิลพาราไทออ นไฮโดรเลสเป็นแหล่งคาร์บอนเพียงแหล่งเดียว โดยมีวัตถุประสงค์เพื่อบ่งชี้ยีนเมททิลพาราไทออนไฮโดรเลส โคลน หาลำดับนิวคลีโอไทด์ วิเคราะห์และศึกษาการแสดงออกของยีนที่โคลน จากการศึกษาขั้นต้นบ่งชี้ว่ายีนเมททิลพาราไทออนไฮโดรเลสของเชื้อตัวนี้น่าจะ แตกต่างจากยีนย่อยสลายยาฆ่าแมลงกลุ่มออร์กาโนฟอสเฟตบางตัวที่เคยมีการรายงาน ไว้ (opd gene) เอนไซม์เมททิลพาราไทออนไฮโดรเลสจากเชื้อได้ถูกนำมาแยกบริสุทธิ์และวิเคราะห์ หาลำดับกรดอะมิโนที่ปลายด้านอะมิโนจากการศึกษาขั้นต้นที่ผ่านมา ในงานวิจัยนี้จึงได้ทดลองทำ PCR กับ genomic DNA ของเชื้อโดยใช้ไพรเมอร์จากลำดับนิวคลีโอไทด์ที่ถอดรหัสจากลำดับกรดอะมิโนที่ หาได้เพื่อบ่งชี้ยีนเมททิลพาราไทออนไฮโดรเลสแต่ไม่ประสบผลสำเร็จเพราะไพร เมอร์ degenerate มาก จึงใช้วิธีบ่งชี้ยีน 2 วิธีไปพร้อมกันคือการบ่งชี้ยีนจาก subgenomic DNA library ทั้งที่ใช้และไม่ใช้ probe ทำ Southern hybridization และวิธี PCR โดยใช้ไพรเมอร์ที่มีลำดับนิวคลีโอไทด์จากยีนเมททิลพาราไทออนไฮโดรเลสของ เชื้อตัวอื่นที่เพิ่งตีพิมพ์ในระยะนั้น (mpd gene) ผลจาก PCR ได้ชิ้นส่วนดีเอ็นเอขนาด 1,404 คู่เบส เมื่อหาลำดับนิวคลีโอไทด์พบว่ามี open reading frame ขนาด 996 คู่เบส แปลรหัสเป็นกรดอะมิโนได้ 331 ตัว จากการเปรียบเทียบลำดับนิวคลีโอไทด์และลำดับกรดอะมิโนพบว่ามีความเหมือนกับ ยีนจากเชื้ออื่นในกลุ่ม mpd gene และแตกต่างจากกลุ่ม opd gene อย่างชัดเจน ชิ้นส่วนดีเอ็นเอนี้ถูก subclone เข้าไปใน expression vector และพบว่ายีนสามารถแสดงออกได้เอนไซม์เมททิลพาราไทออนไฮโดรเลสที่เป็น fusion protein ขนาดประมาณ 61 kDa สอดคล้องกับเอนไซม์ที่พบตามธรรมชาติซึ่งมีขนาดประมาณ 35 kDa |
| บรรณานุกรม | : |
เจษฎาวรรณ วิจิตรเวชการ , Jesadawan Wichitwechkarn . (2547). การวิเคราะห์ในระดับยีนของเชื้อ Pseudomonas sp. ที่สามารถย่อยสลายยาฆ่าแมลง Methyl Parathion.
ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ. เจษฎาวรรณ วิจิตรเวชการ , Jesadawan Wichitwechkarn . 2547. "การวิเคราะห์ในระดับยีนของเชื้อ Pseudomonas sp. ที่สามารถย่อยสลายยาฆ่าแมลง Methyl Parathion".
ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ. เจษฎาวรรณ วิจิตรเวชการ , Jesadawan Wichitwechkarn . "การวิเคราะห์ในระดับยีนของเชื้อ Pseudomonas sp. ที่สามารถย่อยสลายยาฆ่าแมลง Methyl Parathion."
ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ, 2547. Print. เจษฎาวรรณ วิจิตรเวชการ , Jesadawan Wichitwechkarn . การวิเคราะห์ในระดับยีนของเชื้อ Pseudomonas sp. ที่สามารถย่อยสลายยาฆ่าแมลง Methyl Parathion. ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ; 2547.
|
