เฮพาแรน ซัลเฟตเป็นกลัยโคสมิโนกลัยแคน (GAGs) ที่พบอยู่ทั่วไปบนผิวเซลล์หลายชนิด และ พบยึดจับแบบโควาเลนท์กับแกนโปรตีนในรูปของโปรติโอกลัยแคน เฮพาแรนซัลเฟต โปรติโอ กลัยแคน หรือ HSPG มีส่วนเกี่ยวข้องในกระบวนการพื้นฐานของเซลล์หลายอย่างรวมถึงการเจริญเติบโต และ ปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์และ/หรือเซลล์แมทริกซ์ การศึกษาในระดับโมเลกุลและความจำเพาะของ ปฏิสัมพันธ์แบบต่างๆ ของเซลล์ในสภาวะทางชีวภาพที่เหมาะสมที่เกี่ยวข้องกับ HSPG จึงจำเป็นต้อง ใช้โมเลกุลบริสุทธิ์ที่แยกจากเนื้อเยื่อปกติ ตับเป็นอวัยวะที่มีบทบาทต่อการเกิดพยาธิสภาพที่สำคัญ หลายอย่าง เช่น มาลาเรียและไวรัสไข้เลือดออก แม้ว่าการติดเชื้อจะสัมพันธ์กับระดับของเอนไซม์ตับที่ เพิ่มสูงขึ้น แต่ในความเป็นจริงพบว่าการประเมินสภาวะและความรุนแรงยังต่ำกว่าที่ควร แม้ว่าจะตรวจ พบระดับของเอนไซม์ตับเพิ่มสูงขึ้นในกระแสเลือดก็ตาม มีเซลล์หลายชนิดเป็นองค์ประกอบของ เนื้อเยื่อตับ อย่างไรจากการเพาะเลี้ยงเซลล์ต่างๆ พบว่าเฮพาโตชัยท์ซึ่งเป็นเซลล์ชนิดที่พบมากที่สุดนั้น สร้างโมเลกุล HS ในปริมาณมาก เพื่อศึกษากิจกรรมต่างๆ ของเซลล์ตับในความเกี่ยวข้องกับโมเลกุล HSPG ผู้วิจัยได้ทำการแยกสกัด HSPG จากตับมนุษย์และแบ่งออกเป็นส่วนต่างกันจำนวน 4 ส่วน (A-D) ที่มีความแตกต่างกันในปริมาณประจุลบ และน้ำหนักโมเลกุล (A1-A4, B1-B4, C1-C4, D1-D4) จากนั้นนำส่วน C2 และ D2 ที่มีประจุลบสูงและน้ำหนักโมเลกุลมากมาใช้เป็นแอนติเจนในการฉีด กระตุ้นสัตว์ทดลอง และผลิตโมโนโคลนอล แอนติบอดีด้วยเทคนิคมาตรฐาน จากนั้นทำให้บริสุทธิ์และ ศึกษาลักษณะความจำเพาะของแอนติเจน และการกระจายตัวของแอนติเจนดังกล่าวบนผิวเซลล์เม็ด เลือดขาว การศึกษาพบว่าโมโนโคลนอล แอนติบอดีจำเพาะต่อแอนติเจน D2 สามารถทำปฏิกิริยากับ HSPG ทั้งสี่ส่วน ที่น่าสนใจ คือ anti-D2 เมื่อทำปฏิกิริยากับแอนติเจน D1 และ/หรือ D2 พบแถบโปรตีน สองแถบใน reduced gel เสมอ แต่แสดงแถบโปรตีนเพียงหนึ่งแถบกับแอนติเจนส่วนอื่นที่เหลือคือ A1, B1, C1 หรือ C2 โดยมีขนาดของน้ำหนักโมเลกุลใกล้เคียงกัน นอกจากนี้เมื่อนำแอนติเจน D2 ทำ ปฏิกิริยากับ anti-CD138 พบว่าให้ผลต่างจากเมื่อทำปฏิกิริยากับ anti-D2 คือปรากฎแถบโปรตีนเพียง หนึ่งแถบทั้งใน reduced และ non-reduced gel และในขนาดที่แตกต่างกัน สำหรับ anti-C2 ไม่ว่าจะ ทำปฏิกิริยากับแอนติเจนใดๆ พบว่าแสดงแถบโปรตีนเพียงหนึ่งแถบเท่านั้น แต่มีขนาดน้ำหนักโมเลกุล ที่ใกล้เคียงกัน ซึ่งเชื่อว่า A1, B1 และ C1 น่าจะเป็น HSPG โมเลกุลเดียวกันแต่ที่มีขนาดต่างกัน เล็กน้อยขึ้นกับความแตกต่างของจำนวน GAGs ที่ยังหลงเหลือติดอยู่หลังจากย่อยด้วยเอนไซม์ ผลจาก การศึกษาสามารถชี้ให้เห็นว่า HSPGs ที่แยกสกัดจากตับมนุษย์มีจำนวนมากกว่าหนึ่งชนิด และหนึ่งใน จำนวนทั้งหมดนั้นเป็น CD-138 ผลการศึกษาการกระจายตัวของ HSPGs จากตับบนเซลล์เม็ดเลือด ขาวของคนปกติและเซลล์มะเร็งเพาะเลี้ยง พบว่ามีการแสดงออกของโมเลกุลบนผิวเซลล์เม็ดเลือดขาว เพาะเลี้ยงชนิด HL-60 และ K-562 ซึ่งเป็นเซลล์ที่มีต้นกำเนิดในสายมัยอิลอยด์ และไม่พบในเซลล์เม็ด เลือดขาวปกติหรือเซลล์มะเร็งเพาะเลี้ยงในกลุ่มอื่น จึงเป็นที่น่าสนใจว่าเซลล์เม็ดเลือดขาวมีการ แสดงออกของโมเลกุลที่คล้ายกับ HSPGs ของตับเพราะสามารถทำปฏิกิริยากับแอนติบอดีจำเพาะต่อ HSPGs ของตับ และโมเลกุลดังกล่าวนี้จะแสดงออกเมื่อเซลล์มีการเปลี่ยนแปลงไปเป็นเซลล์มะเร็ง Heparan sulfate is the most ubiquitous glycosaminoglycans (GAGs) on the cell surfaces. It is found covalently linked to protein in the form of proteoglycans. Heparan sulfate proteoglycans (HSPGs) have been implicated in a number of fundamental cellular processes, including control of cell growth and cell-cell matrix abhesion. Elucidation of the molecular nature and specificities of these interactions requires the availability of pure HSPG and from normal tissues, with which to test them in the appropriate biological contexts. The role of liver in centain diseases such as malerial and viral infection has been generally underestimated, although the infection is regularly associated with elevated liver enzymes. Liver comprises a number of cell type, however, the most abundant hepatocytes synthesize predominantly HS is culture. In order to study the liver cellular activities in collaborate with HSPG, we isolated and fractionated HSPGs from normal human liver into 4 major fractions by means of anionic (A-D) and molecular mass (A1-A4, B1-B4, C1-C4, D1-D4). The last 2 fractions (C2 and D2) with high molecular mass and negative charge were used to immunize and produce monoclonal antibodies (MAbs) by standard hybridoma technique. The MAbs obtained was also characterized for their specificities and distribution on peripheral white blood cells. The studies showed that anti-D2 MAb can react with all isolated fractions. It is interesting that anti-D2 showed 2 bands in reduced gel when reacts with D1 or D2 and shows only 1 band with A1, B1, C1 or C2. Moreover, D2 showed 1 band in each condition with different molecular weight when it was detected with anti-CD138. It could be suggested that D1 and D2 fractions are the same molecules but were fractionated into 2 charge differences. In addition, there are more than one types of HSPGs isolated from human liver and one of them is CD138. Anti-C2 showed different pattern of immunoblotting from anti-D2 since there was only 1 band when it reacted with A1, B1, C1, C2, D1 or D2. All bands are very close to each other in molecular weight. We believed that A1, B1 or C1 are the same molecule but they showed different molecular weight because of different remaining attached GAGs size. In addition, the results suggests that there are more than one types of HSPGs in liver extract where CD-138 is one of them. Finally, anti-D2 showed positive staining with HL-60 and K562, the cell lines in myeloid lineage but negative with normal granulocyte. It is interestin that cells myeloid lineage showed membrane molecule resembles to human liver HSPGs when they turn to tumor stage.