| ชื่อเรื่อง | : | การศึกษาปัจจัยที่มีผลส่งเสริมประสิทธิภาพในการถ่ายยีนให้กับโซมาติคเอมบริโอของมะละกอด้วยเชื้ออะโกรแบคทีเรีย(~iAgrobacterium tumefaciens~i) |
| นักวิจัย | : | วิจิตรา โหราเรือง |
| คำค้น | : | - |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2547 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1162547000288 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | การศึกษาเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพของการถ่ายยีนเข้าสู่โซมาติคเอมบริโอของมะละกอโดยทดลองใช้เชื้อ ~iAgrobacterium tumefaciens~i สายพันธุ์ ABI ซึ่งบรรจุพลาสมิดpMON51744 ที่มียีน ~igus~i ซึ่งเป็นยีนที่ควบคุมการสร้างเอนไซม์ (+,b)-glucuronidaseเป็นยีนรายงานผล และมียีน neomycin phosphotransferase II (~inpt~iII) เป็นยีนคัดเลือกซึ่งยีนทั้งสองนี้จะถูกถ่ายทอดเข้าสู่เนื้อเยื่อโซมาติคเอมบริโอของมะละกอสายพันธุ์แขกดำและแขกนวล จากการศึกษาผลการถ่ายยีนโดยตรวจสอบการแสดงออกของยีน ~igus~i หลังการถ่ายยีนเป็นเวลา 5 วัน (transient expression) พบว่าการเติม ascorbic acid 100 มิลลิกรัมต่อลิตรหรือการเติม ascorbic acid 100 มิลลิกรัมต่อลิตรร่วมกับ acetosyringone 100 ไมโครโมลาร์ลงในอาหารเลี้ยงเชื้ออะโกรแบคทีเรีย และวิธีถ่ายยีนด้วยการใช้วิธี sonication ร่วมกับโซมาติคเอมบริโอที่แช่ในสารละลายเชื้ออะโกรแบคทีเรียเป็นเวลา 40 และ 80 วินาที มีผลทำให้ประสิทธิภาพการถ่ายยีนสูงขึ้น ในขณะที่การใช้อาหาร Minimal medium (MM) เปรียบเทียบกับการใช้อาหาร 2xYT ในการเลี้ยงเชื้ออะโกรแบคทีเรียหรือค่าความเป็นกรด-ด่าง และการเติมdithiothreitol (DTT) ของอาหารเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชในขั้นตอนการบ่มเนื้อเยื่อพืชในขั้นตอนการบ่มเนื้อเยื่อพืชร่วมกับเชื้อแบคทีเรีย (co-cultivation) ไม่มีผลทำให้ประสิทธิภาพของการถ่ายยีนเพิ่มขึ้นสำหรับการเติม arginine 0.5-1.0 มิลลิโมลาร์ L-cysteine 300-600 มิลลิกรัมต่อลิตรน้ำมะพร้าว 5-25 เปอร์เซ็นต์ และ polyvinylpolypyrrolidone (PVPP) 3 เปอร์เซ็นต์ ลงในอาหารเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชในช่วง co-cultuvation มีผลทำให้ประสิทธิภาพของการถ่ายยีนลดลง ปัจจัยที่ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพของการถ่ายยีนนี้ไม่มีผลต่อการพัฒนาเป็นต้นมะละกอดัดแปรพันธุกรรม สามารถตรวจพบยีน ~igus~i ด้วยวิธี PCR และวิธี Southern hybridizationแสดงว่ามะละกอดัดแปรพันธุกรรมที่ได้มียีน ~igus~i แทรกอยู่ในโครโมโซม |
| บรรณานุกรม | : |
วิจิตรา โหราเรือง . (2547). การศึกษาปัจจัยที่มีผลส่งเสริมประสิทธิภาพในการถ่ายยีนให้กับโซมาติคเอมบริโอของมะละกอด้วยเชื้ออะโกรแบคทีเรีย(~iAgrobacterium tumefaciens~i).
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. วิจิตรา โหราเรือง . 2547. "การศึกษาปัจจัยที่มีผลส่งเสริมประสิทธิภาพในการถ่ายยีนให้กับโซมาติคเอมบริโอของมะละกอด้วยเชื้ออะโกรแบคทีเรีย(~iAgrobacterium tumefaciens~i)".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. วิจิตรา โหราเรือง . "การศึกษาปัจจัยที่มีผลส่งเสริมประสิทธิภาพในการถ่ายยีนให้กับโซมาติคเอมบริโอของมะละกอด้วยเชื้ออะโกรแบคทีเรีย(~iAgrobacterium tumefaciens~i)."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2547. Print. วิจิตรา โหราเรือง . การศึกษาปัจจัยที่มีผลส่งเสริมประสิทธิภาพในการถ่ายยีนให้กับโซมาติคเอมบริโอของมะละกอด้วยเชื้ออะโกรแบคทีเรีย(~iAgrobacterium tumefaciens~i). กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2547.
|
