ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

สมบัตของเอนไซม์อัลคาไลน์โปรติเอสจากแบคทีเรียที่แยกได้จากดิน

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : สมบัตของเอนไซม์อัลคาไลน์โปรติเอสจากแบคทีเรียที่แยกได้จากดิน
นักวิจัย : สุดธิดา แสงยนต์
คำค้น : -
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2547
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1162547000278
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

ได้แยกแบคทีเรียที่มีความสามารถในการย่อยโปรตีนในสภาะที่เป็นด่าง จำนวน 61 สายพันธุ์จากตัวอย่างดิน 30 ตัวอย่าง โดยใช้อาหาร basal medium agar ที่เติม skim milk เปอร์เซ็นต์(BMSM) พีเอช 11 การคัดเลือกสายพันธุ์ที่ผลิตเอนไซม์อัลคาไลน์โปรติเอสสูง แบ่งเป็น2 ขั้นตอน คือ ขั้นแรกทำการเปรียบเทียบอัตราส่วนและผลต่างระหว่างเส้นผ่าศูนย์กลางของวงใสและเส้นผ่าศูนย์กลางของโคโลนี ขั้นที่สองเปรียบเทียบกิจกรรมของ crude enzyme ที่ผลิตในอาหารเหลว BMSM พีเอช 11 พบว่า เชื้อสายพันธุ์ A39 สามารถผลิตเอนไซม์อัลคาไลน์โปรติเอสได้สูงสุดที่เวลา 36 ชั่วโมง และเป็นแบคทีเรียในจีนัส ~iBacillus~i ซึ่งแยกได้จากดินสวนลำไย จังหวัดจันทบุรี บริเวณผิวดิน จากการศึกษาผลของ yeast extract และ skim milkพบว่า A39 สามารถผลิตเอนไซม์อัลคาไลน์โปรติเอสได้สูงสุดเท่ากับ 233.5 หน่วยต่อมิลลิลิตรเมื่อเลี้ยงในอาหารเหลว BMSM ที่มี yeast extract 5 กรัมต่อลิตร และ skim milk 10 กรัมต่อลิตรเป็นองค์ประกอบ แต่เมื่อลดปริมาณ skim milk ลงเหลือ 2.5 กรัมต่อลิตร เชื้อสามารถผลิตเอนไซม์อัลคาไลน์โปรติเอสได้สูงขึ้น โดยมีกิจกรรมเท่ากับ 467.2 หน่วยต่อมิลลิลิตร และสันนิษฐานว่า casein ซึ่งเป็นโปรตีนหลักใน skim milk เป็นตัวเหนี่ยวนำให้เชื้อมีการสร้างเอนไซม์อัลคาไลน์โปรติเอสออกมา สภาวะที่เหมาะสมต่อกิจกรรมของเอนไซม์ คือ ที่อุณหภูมิ55 องศาเซลเซียส พีเอช 11 และมีความคงตัวในช่วงอุณหภูมิ 30 ถึง 50 องศาเซลเซียส และที่พีเอสระหว่าง 7.5 ถึง 12 เป็นเวลา 30 นาที ไอออนของ Ca('2+), Mg('2+), Ba('2+) และCu('2+) ความเข้มข้น 10 mM ช่วยกระตุ้นกิจกรรมของเอนไซม์ ขณะที่ Ni('2+),Zn('2+), Fe('3+), Co('2+), Mn('2+) และ Hg('2+) สามารถยับยั้งกิจกรรมของเอนไซม์ นอกจากนี้เอนไซม์ยังทนต่อสารลดแรงตึงผิวประเภทนอนไอออนิก เช่น triton X-100 1% และ tween 80 1%แต่ไม่มีความคงตัวต่อสาร SDS 10 mM และ hydrogen peroxide 1% ดังนั้นเอนไซม์นี้จัดอยู่ในกลุ่มของ metalloprotease เนื่องจากถูกยับยั้งการทำงานโดยสาร EDTA และ 1,10-phenanthrolineเมื่อศึกษาจลนพลศาสตร์ของเอนไซม์โดยใช้สารละลายเคซีน พีเอช 11 เป็นสับสเตรท และทำปฏิกิริยาภายใต้อุณหภูมิ 55 องศาเซลเซียส พบว่า เอนไซม์มีค่า K(,m) เท่ากับ 14.68 mg/ml และมีค่าV(,max) เท่ากับ 131.58 (+,m)g/ml.min หรือ 0.73 mmol/min ตามลำดับ

บรรณานุกรม :
สุดธิดา แสงยนต์ . (2547). สมบัตของเอนไซม์อัลคาไลน์โปรติเอสจากแบคทีเรียที่แยกได้จากดิน.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
สุดธิดา แสงยนต์ . 2547. "สมบัตของเอนไซม์อัลคาไลน์โปรติเอสจากแบคทีเรียที่แยกได้จากดิน".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
สุดธิดา แสงยนต์ . "สมบัตของเอนไซม์อัลคาไลน์โปรติเอสจากแบคทีเรียที่แยกได้จากดิน."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2547. Print.
สุดธิดา แสงยนต์ . สมบัตของเอนไซม์อัลคาไลน์โปรติเอสจากแบคทีเรียที่แยกได้จากดิน. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2547.