ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การทำให้บริสุทธิ์และศึกษาคุณสมบัติของเลคตินจากเมล็ด เหรียง

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การทำให้บริสุทธิ์และศึกษาคุณสมบัติของเลคตินจากเมล็ด เหรียง
นักวิจัย : ไพฑูรย์ อรรฆยานนท์
คำค้น : -
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2536
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=57688
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

การสกัดเลคตินจากเมล็ดเหรียงให้ได้ผลดีที่สุดทำได้ โดยปั่นละเอียดเมล็ดเหรียงใน PBS และคนนาน 12 ชั่วโมง จากนั้นสกัดไขมันออกด้วยปิโตรเลียม อีเธอร์ แล้วนำมาตก ตะกอนด้วยแอมโมเนียมซัลเฟตที่ความอิ่มตัว 60% เป็นเวลา 6 ชั่วโมง สารสกัดเลคตินที่ได้จะมีความว่องไวจำเพาะสูง สุดในการจับกลุ่มเม็ดเลือดแดงกระต่าย เมล็ดเหรียงและเม็ด เลือดแดงที่เหมาะสม เพื่อใช้ในการศึกษาการจับกลุ่มเซลล์ เม็ดเลือดแดง คือ เมล็ดเหรียงที่เพาะเป็นเวลา 7 วัน และ เม็ดเลือดแดงซึ่งเตรียมจากเลือดสดสารสกัดจากเมล็ดเหรียง สามารถทำให้เม็ดเลือดแดงกระต่ายจับกลุ่มดีที่สุด (251.10 หน่วย/มก.โปรตีน) รองลงมาได้แก่ เม็ดเลือดแดงของหนูขาว (3.92 หน่วย/มก.โปรตีน) แต่ไม่ทำให้เม็ดเลือดแดงของคน แกะ หรือห่าน เกิดการจับกลุ่ม ทำให้เลคตินบริสุทธิ์จากสารสกัดเลคตินได้โดยใช้ เทคนิคด้านคอลัมน์โครมาโตกราฟี 2 วิธี คือ วิธีที่ 1 ทำการแยกสารสกัดเลคตินโดยคอลัมน์ Sephadex G 100, Sephadex G 200 และ DEAE-ellulose ตามลำดับ วิธีที่ 2 แยกสารสกัดเลคตินด้วยคอลัมน์ DEAE-cellulose, Sephadex G 100 และ D-mannose agarose ตามลำดับ โปรตีนที่ถูกดูด ซับโดย Sephadex, DEAE-cellulose และ D-mannose agarose ถูกชะออกโดยน้ำตาลมอลโตน, โซเดียมคลอไรด์ และน้ำตาล แมนโนส ตามลำดับ เลคตินบริสุทธิ์ประกอบด้วยโปรตีนสองชนิด ที่มีปริมาณ ไม่เท่ากันเพราะเมื่อนำไปผ่านการทำโพลีอะคริลาไมด์ เจล อิเล็กโตฟอรีซิสทั้งแบบไม่เสียสภาพธรรมชาติ และแบบมี เอสดีเอส ได้ผล เช่น เดียวกันคือปรากฎโปรตีนสองแถบซึ่ง ย้อมติดสีคูมาซี บลู เข้มไม่เท่ากัน โปรตีนทั้งสองชนิด ประกอบด้วยสายโพลีเปปไทด์เพียงสายเดียว โปรตีนชนิดที่มี มากมีน้ำหนักโมเลกุล 47870 ดัลตัน โปรตีนชนิดที่มีน้อยมี น้ำหนักโมเลกุล 45700 ดัลตัน เลคตินบริสุทธิ์ มีความว่องไวจำเพาะในการจับกลุ่ม เม็ดเลือดแดงกระต่าย (68,266 หน่วย/มก.โปรตีน) สูงกว่า การจับกลุ่มเม็ดเลือดแดงของหนูขาว (266 หน่วย/มก.โปรตีน) แต่ไม่ทำให้เม็ดเลือดแดงของ คน แกะ หรือห่านจับกลุ่ม ความว่องไวจำเพาะในการจับกลุ่มเม็ดเลือดแดงกระต่ายเพิ่ม กว่าเดิม 64 เท่า เมื่อย่อยเม็ดเลือดแดงกระต่ายก่อนด้วย เอนไซม์ทริปซิน ไดวาเลนท์แคทไอออน ซึ่งสามารถกระตุ้นการจับกลุ่ม เม็ดเลือดแดงเรียงจากมากไปน้อยได้แก่ Ca2+, Mn2+ และ Mg2+ ตามลำดับ ส่วนอีจีทีเอ ไม่มีผลต่อการจับกลุ่มเม็ด เลือดแดง น้ำตาลเมธิลแอลฟ่า-ดี แมนโนซามีน และน้ำตาล แมนโนส ที่ระดับความเข้นข้น 5 มิลลิโมลาร์ สามารถยับยั้ง ปฏิกริยาการจับกลุ่มเม็ดเลือดแดง โดยเลคตินได้ 100% น้ำตาลชนิดอื่น ๆ มีผลยับยั้งน้อยหรือไม่ยับยั้งเลย น้ำตาลฟรุคโตน และแซคคาโรส มีผลยับยั้งปฏิกริยาการจับ กลุ่มเม็ดเลือดแดง น้อยกว่า 100% ที่ระดับความเข้มข้น 200 มิลลิโมลาร์ แต่น้ำตาลกาแลคโตส, เอ็น-อะซิติล กาแลคโตซามีน และน้ำตาลเอ็น-อะซิติล-ดี-แมนโนซามีน ไม่มีผลยับยั้งการจับกลุ่มเซลล์แต่อย่างใด ที่ระดับความ เข้มข้น 200 มิลลิโมลาร์ เลคตินบริสุทธิ์มีความเสถียรที่อุณหภูมิสูงถึง 50ํซ ความว่องไวในการจัดกลุ่มเม็ดเลือดแดง ลดอย่างรวดเร็ว เมื่ออุ่นเลคตินที่อุณหภูมิระหว่าง 60-80ํซ เลคตินจะมี ความเสถียรและมีความว่องไวในการจัดกลุ่มเม็ดเลือดแดง ดีที่สุดที่ pH7 pH เป็นกรดหรือเบสมากขึ้น มีผลทำให้ทั้ง ความเสถียรและปฏิกิริยาการจัดกลุ่มของเม็ดเลือดแดงยิ่ง ลดน้อยลง

บรรณานุกรม :
ไพฑูรย์ อรรฆยานนท์ . (2536). การทำให้บริสุทธิ์และศึกษาคุณสมบัติของเลคตินจากเมล็ด เหรียง.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
ไพฑูรย์ อรรฆยานนท์ . 2536. "การทำให้บริสุทธิ์และศึกษาคุณสมบัติของเลคตินจากเมล็ด เหรียง".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
ไพฑูรย์ อรรฆยานนท์ . "การทำให้บริสุทธิ์และศึกษาคุณสมบัติของเลคตินจากเมล็ด เหรียง."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2536. Print.
ไพฑูรย์ อรรฆยานนท์ . การทำให้บริสุทธิ์และศึกษาคุณสมบัติของเลคตินจากเมล็ด เหรียง. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2536.