มะเร็งเป็นโรคที่เกิดเนื่องจากการสูญเสียความสามารถในการควบคุมการเจริญเติบโต และการแบ่งขยายเซลล์ การสูญเสียกลไกในการควบคุมนี้อาจจะทำให้เกิดการลุกลามและแพร่ กระจายไปยังเนื้อเยื่อของอวัยวะอื่นๆ ทั้งรอบๆ ก้อนมะเร็งและอวัยวะที่อยู่ห่างไกล ออกไป ขบวนการนี้เรียกว่า Metastasis กลไกหนึ่งซึ่งมีความสำคัญในการส่งสัญญาณของ เซลล์โดยเฉพาะอย่างยิ่ง Ras/Raf/MAP kinase pathway ซึ่งมีผลต่อการแบ่งเซลล์และการ เคลื่อนที่ของเซลล์ ซึ่งเกี่ยวข้องกับขบวนการแพร่กระจายของเซลล์ จากการศึกษาก่อน หน้านี้พบว่า MAP kinase มีส่วนสำคัญและจำเป็นในการบุกรุกของเซลล์โดยผ่านขบวนการ การเคลื่อนที่ และเมื่อทำการยับยั้ง active MAP kinase โดย MEK inhibitor (PD098059) แล้วพบว่าสามารถยับยั้งการบุกรุก และการเคลื่อนที่ของเซลล์ โครงการวิจัยนี้ เราต้องการทดสอบว่าเซลล์มะเร็งที่มีความสามารถในการบุกรุกต่ำ ต้องการ MAP kinase ในการเพิ่มความสามารถในการบุกรุก ดังนั้นเราจึงมีวัตถุประสงค์ ที่จะพัฒนาสายพันธ์ของเซลล์ AT-01 ซึ่งเป็นมะเร็งต่อมลูกหมากหนูที่มีความสามารถใน การแพร่กระจายและมีระดับของ active MAP kinase ต่ำ ให้มีการผลิต active MAP kinase ตลอดเวลา โดยการนำ active mutant MEK (MEK EE) gene ซึ่งเป็นเอนไซม์สำคัญในการ กระตุ้นการทำงานของ MAP kianse เข้าสู่เซลล์ AT-01 และเนื่องจากการยับยั้งการบุกรุก ของเซลล์เป็นผลจากการยับยั้งการเคลื่อนที่ของเซลล์ ดังนั้นเราจึงต้องการพิสูจน์ว่า การที่ MEK inhibitor สามารถยับยั้งการเคลื่อนที่ของเซลล์นั้น เป็นผลจากการที่ MEK inhibitor มีผลต่อการจัดเรียงตัวของ actin ซึ่งเป็นโปรตีนสำคัญในกลไกพื้นฐานในการ เคลื่อนที่ของเซลล์ ผลการทดลองพบว่า การพัฒนาสายพันธ์ที่ผลิต Active MEK ไม่ประสบความสำเร็จ เนื่องจากระดับของ active MAP kinase ในเซลล์ที่นำ MEK EE เข้าไปนั้น มีระดับเซลล์ ที่ไม่ได้มีการนำ MEK EE เข้าไป ถึงแม้ว่าสามารถพิสูจน์โดยวิธี PCR ได้ว่า MEK EE gene สามารถเข้าไปอยู่ในเซลล์ได้จริง ผลการทดลองจากการศึกษาผลกระทบของ MEK inhibitor ต่อการจัดเรียงตัวของ actin โดยวิธี Fluorescence staining พบว่าการ treat ด้วย 100(+,m)M MEK inhibitor สามารถ ชักนำให้เกิดการแผ่ขยายของเซลล์และเกิด stress fiber อีกทั้งยังพบว่ามีการลดลงของ membrane ruffle และปริมาณ actin ที่สะสมที่ปลายเซลล์ อาจกล่าวได้ว่า การยับยั้งการ เคลื่อนที่ของเซลล์ด้วย MEK inhibitor เป็นผลเนื่องจากการจัดเรียงตัวของ actin