ในงานวิจัยครั้งนี้ได้ศึกษากรดอะมิโนในส่วนเชื่อมต่อระหว่างเกลียวอัลฟาที่ 4 และ เกลียวอัลฟาที่ 5 ที่มีผลต่อฤทธิ์การฆ่าลูกน้ำยุงลายของโปรตีนสารพิษ 130-kDa Cry4B จากแบคทีเรีย ~iBacillus thuringiensis~i โดยได้เปลี่ยนแปลงกรดอะมิโนในส่วนเชื่อม ต่อระหว่างเกลียวดังกล่าว โดยที่กรดอะมิโนทั้ง 3 ตำแหน่ง คือ asparagine ที่ตำแหน่ง 166 tyrosine ที่ตำแหน่ง 170 และ glutamate ที่ตำแหน่ง 171 ได้ถูกเปลี่ยนเป็น alanine และกรดอะมิโนอื่นๆ โดยอาศัยวิธีการเปลี่ยนแปลงยีนเฉพาะที่ด้วยเทคนิคปฏิกิริยาลูกโซ่ โพลีเมอเรส (PCR) ซึ่งได้สร้างโปรตีนกลายพันธุ์ที่ถูกออกแบบตามแบบจำลองโครงสร้าง 3 มิติของโปรตีนสารพิษ Cry4B รวม 17 ชนิด ได้แก่ N166A, N166D, N166Q, N166R, A166C, N166I, N166Y ซึ่งได้เปลี่ยน asparagine ที่ตำแหน่ง 166 เป็น alanine, aspartate, glutamine, arginine, cystein, isoleucine และ tyrosine ตามลำดับ และ Y170A, Y170D, Y170R, Y170F, Y170W และ Y170L ซึ่งได้เปลี่ยน tyrosine ที่ตำแหน่ง 170 เป็น alanine, aspartate, arginine, phenylalanine, tryptophan และ leucine ตามลำดับ นอกจากนี้ ยังได้สร้างโปรตีนกลายพันธุ์อีก 4 ชนิด ได้แก่ E171A, E171K, K171D และ E171Q โดยได้เปลี่ยน glutamate ที่ตำแหน่ง 171 เป็น alanine, lysine, aspartate และ glutamine เมื่อได้แสดงออกในแบคทีเรีย ~iEscherichia coli~i พบว่า โปรตีนกลาย พันธุ์ทั้ง 17 ชนิดได้ถูกสร้างในรูปก้อนผลึก และยังมีความสามารถในการละลายในสารละลาย คาร์บอเนต และให้รูปแบบผลจากการตัดด้วยเอ็นไซม์ทริปซินเหมือนกับโปรตีนต้นแบบ นอกจากนี้ เมื่อทดสอบผลจากฆ่าลูกน้ำยุงลาย พบว่าเมื่อแทนที่ asparagine ที่ตำแหน่ง 166 ด้วยกรด อะมิโนที่มีขั้วเช่น aspartate, glutamine, arginine, cystein และ tyrosine จะยังคง มีฤทธิ์ในการฆ่าลูกน้ำยุงลายเท่ากับโปรตีนต้นแบบ และการแทนที่ tyrosine ที่ตำแหน่ง 170 ด้วยกรดอะมิโนที่มีโครงสร้าง aromatic ได้แก่ phenylalanine และ tryptophan ไม่มีผล กระทบต่อฤทธิ์ในการฆ่าลูกน้ำยุงลาย ในขณะที่โปรตีนกลายพันธุ์ชนิดอื่นสูญเสียความสามารถใน การฆ่าลูกน้ำโดยสิ้นเชิง นอกจากนี้เมื่อแทนที่ glutamate ที่ตำแหน่ง 171 ด้วย lysine และ aspartate จะทำให้ฤทธิ์การฆ่าลูกน้ำลดลง ขณะที่เมื่อแทนที่ด้วย glutamine จะมีฤทธิ์ การฆ่าลูกน้ำสูงขึ้นเหมือนเดิม ผลงานวิจัยนี้ได้แสดงให้เห็นว่า asparagine-166, tyrosine-170 และ glutamate-171 ซึ่งอยู่ในส่วนเชื่อมต่อระหว่างเกลียวอัลฟาที่ 4 และ 5 นั้นสำคัญต่อฤทธิ์ในการฆ่าลูกน้ำยุงลาย โดยเฉพาะอย่างยิ่งความมีขั้วที่ตำแหน่ง 166, โครงสร้าง aromatic ที่ตำแหน่ง 170.