| ชื่อเรื่อง | : | การแสดงออกและการหลั่งออกนอกเซลล์ของฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของ ปลาบึกในยีสต์ที่สามารถใช้เมทานอล ~iPICHIA PASTORIS~i |
| นักวิจัย | : | ภูวดล บางรักษ์ |
| คำค้น | : | METHYLOTROPHIC YEAST , ~iPICHIA PASTORIS~i , GIANT CATFISH GROWTH HORMONE , MF(+,a)-1 , SECRETION |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2542 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=43812 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | ยีนที่สร้างฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของปลาบึก ~iPangasianodon gigas~i (~igcGH~i cDNA) สามารถแสดงออกในยีสต์ที่สามารถใช้เมทานอล ~iPichia pastoris~i ทั้งแบบภายในเซลล์และหลั่งออกนอกเซลล์ภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์ ~iAOX1~i ระบบของการแสดงออกภายในเซลล์ของฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของปลาบึกถูกสร้างขึ้น โดยประกอบด้วยลำดับเบสของ ACCATG (Kozak sequence) เป็นรหัสเริ่มต้นของการ สังเคราะห์โปรตีน จากการศึกษาพบว่าปริมาณการแสดงออกภายในเซลล์ของฮอร์โมนลูกผสม ประมาณ 80 มิลลิกรัมต่อลิตรของอาหารกระตุ้นการผลิตหลังจากกระตุ้นการแสดงออกของยีน ด้วยเมทานอลเป็นเวลา 6 วัน สำหรับการผลิตฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของปลาบึกให้หลั่ง ออกนอกเซลล์ ทำได้โดยการเชื่อมต่อยีนที่สร้างฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของปลาบึกกับ ลำดับเบสที่ทำให้เกิดการหลั่งออกนอกเซลล์ของยีสต์ ~iSaccharomyces cerevisiae~i (MF(+,a)-1) พบว่าปริมาณของฮอร์โมนที่หลั่งออกนอกเซลล์ประมาณ 200 มิลลิกรัมต่อลิตร ของอาหารกระตุ้นการผลิต นอกจากนี้จากการศึกษาลำดับกรดอะมิโนของฮอร์โมนเร่งการเจริญ เติบโตของปลาบึกที่หลั่งออกนอกเซลล์ พบว่ามีกรดอะมิโนเพิ่มขึ้น 3 ตัว คือ กรดกลูตามิค และอะลามีน ซึ่งเกิดจากการจัดการอย่างไม่สมบูรณ์ของลำดับเบสที่ช่วยให้เกิดการหลั่ง ออกนอกเซลล์ และกรดกลูตามิคซึ่งเป็นส่วนเกินที่ได้จากการเชื่อมต่อกันของยีนที่สร้าง ฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของปลาบึกกับดีเอ็นเอพาหะที่ใช้ในการแสดงออกใน ~P. pastoris~i จากการศึกษาพบว่ามีตำแหน่งของการเติมหมู่น้ำตาล (Asn-X-Ser/Thr) 2 ตำแหน่งในยีนที่สร้างฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของปลาบึก ดังนั้นจึงได้มีการศึกษา การเติมหมู่น้ำตาลของฮอร์โมนที่หลั่งออกนอกเซลล์ จากการทดลองโดยใช้ Endoglycosidase H และการย้อมสีไกลโคโปรตีน พบว่าฮอร์โมนลูกผสมที่ผลิตได้จาก ~iP. pastoris~i ไม่มีการ เติมหมู่น้ำตาล ซึ่งสอดคล้องกับผลที่ได้จากฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของสิ่งมีชีวิตชนิดอื่น |
| บรรณานุกรม | : |
ภูวดล บางรักษ์ . (2542). การแสดงออกและการหลั่งออกนอกเซลล์ของฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของ ปลาบึกในยีสต์ที่สามารถใช้เมทานอล ~iPICHIA PASTORIS~i.
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. ภูวดล บางรักษ์ . 2542. "การแสดงออกและการหลั่งออกนอกเซลล์ของฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของ ปลาบึกในยีสต์ที่สามารถใช้เมทานอล ~iPICHIA PASTORIS~i".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. ภูวดล บางรักษ์ . "การแสดงออกและการหลั่งออกนอกเซลล์ของฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของ ปลาบึกในยีสต์ที่สามารถใช้เมทานอล ~iPICHIA PASTORIS~i."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2542. Print. ภูวดล บางรักษ์ . การแสดงออกและการหลั่งออกนอกเซลล์ของฮอร์โมนเร่งการเจริญเติบโตของ ปลาบึกในยีสต์ที่สามารถใช้เมทานอล ~iPICHIA PASTORIS~i. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2542.
|
