Fasciola gigantica เป็นพยาธิใบไม้ในตับของสัตว์ จตุรบาทหลายประเภทที่ก่อให้เกิดความเสียหายทางเศรษฐกิจ อย่างมากกับปศุสัตว์ ปัจจุบันการตรวจการติดเชื้อทำโดยการ หาและนับไข่พยาธิในอุจจาระของสัตว์ ซึ่งมีข้อจำกัดด้านความ สะดวกและแม่นยำ การศึกษาครั้งนี้จึงมุ่งเน้นการหาแอนติเจน ที่เหมาะสมของพยาธิ เพื่อประโยชน์ในการพัฒนาการตรวจสอบ แบบอิมมูโนต่อไป ผลจากการวิเคราะห์ น้ำเลี้ยงเชื้อของพยาธิใบไม้ในตับ ตัวแก่ พบว่ามีเอนไซม์ cysteine protease พร้อมทั้งมีแถบ โปรตีนแอนติเจนที่เด่นในตำแหน่งน้ำหนักโมเลกุลประมาณ 26-27 kDa เมื่อวิเคราะห์ด้วยวิธี SDS-PAGE และ immunoblotting โดยการใช้ซีรั่มจากวัวที่ติดเชื้อตามธรรมชาติ การพยายามแยก บริสุทธิ์โปรตีนแอนติเจนดังกล่าวด้วยวิธี thiol-affinity chromatography ไม่ประสบผลสำเร็จ ต่อมาพบว่าการใช้ วิธีแยก Cation-exchange-FPLC ตามด้วย chromatofocusing ให้ผลดีที่สุดคือสามารถแยกบริสุทธิ์โปรตีนแอนติเจนได้ 2 ชนิด มีค่า pI 6.4 และ 6.0 น้ำหนักโมเลกุลประมาณ 27 และ 26 kDa ตามลำดับ การศึกษาคุณสมบัติของแอนติเจนบริสุทธิ์ ทั้งสองชนิดพบว่าเป็น cysteine proteases ที่มีองค์ประกอบ ของกรดอะมิโนบางชนิดแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ กล่าวคือ 26 kDa แอนติเจน มี phenylalanine อยู่ 17 ตัว และ tryptophan 9 ตัว ขณะที่ 27 kDa แอนติเจนมี phenylalanine อยู่ 10 ตัว และ tryptophan 2 ตัว การศึกษาถึงแหล่งที่สร้าง แอนติเจนโดยการใช้โมโนโคลนัลแอนติบอดี้ พบแอนติเจนดังกล่าว ในเซลบุผนังลำไส้ของพยาธิ ได้นำโปรตีน 27kDa ไปตรวจหาแอนติบอดี้ในโค, กระบือ ที่ได้ทดลองติดเชื้อ ผลปรากฎว่าสามารถตรวจพบแอนติบอดี้ก่อน การตรวจพบไข่พยาธิประมาณ 10 สัปดาห์ ดังนั้นจึงอาจใช้ cysteine protease แอนติเจนดังกล่าวในการพัฒนาวิธีการ ตรวจสอบการติดเชื้อพยาธิได้