ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การศึกษายีน esterase ของเชื้อ Xanthomonas campestris pv. glycines

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การศึกษายีน esterase ของเชื้อ Xanthomonas campestris pv. glycines
นักวิจัย : อุไรวรรณ อินทมาโส
คำค้น : -
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2538
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=41247
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

เอนไซม์ esterase เป็นเอนไซม์ที่มีความสามารถ ในการย่อยสลายพันธะ ester ในสารประกอบ ester ที่มี ส่วนประกอบเป็นกรดไขมันชนิดสั้น จากการศึกษาเอนไซม์ esterase ที่อยู่ภายในเซลล์ของ Xanthomonas campestris pv. glycines พบว่าเอนไซม์ชนิดนี้เป็นชนิด monomeric protein มีขนาด 59 kDa และการผลิตเอนไซม์ขึ้นกับระยะ การเจริญเติบโตของเซลล์ จากการศึกษาต่อไปถึงปัจจัยที่มี ผลต่อการกระตุ้นการผลิตเอนไซม์ชนิดนี้ พบว่าทั้ง divalent cation และ oxidative agent ไม่มีผลต่อการทำงานของ เอนไซม์ ยีน esterase จากเชื้อ Xanthomonas campestris pv. glycines ได้ถูกแยกจาก genomic DNA library ใน (...)ZipLox ที่ถูก circularized เป็นรูปพลาสมิด pZLI ใน E. coli สายพันธุ์ DH1OB (ZIP) ที่ถูกใช้เป็นเซลล์ เจ้าบ้าน การคัดเลือกโคโลนีที่มียีน esterase อยู่นั้นได้ จากการอาศัยคุณสมบัติของเอนไซม์ที่สามารถย่อยสาร tributyrin ในอาหารเลี้ยงเชื้อเกิดเป็นวงใสๆ ล้อมรอบ โคโลนี ซึ่งทำให้แยกความแตกต่างได้ชัดเจนจากโคโลนี อื่นบนอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีลักษณะทึบแสง โคโลนีที่คัด เลือกได้จำนวน 7 โคลนเป็นยีน esterase จริงเนื่องจาก ไม่สามารถสร้างสารเรืองแสงได้บน rhodamine medium เมื่อส่องดูด้วยแสง UV ซึ่งลักษณะดังกล่าวเป็นคุณสมบัติ ของเอนไซม์ lipase หลังจากนำมาศึกษาโดย restriction mapping และ Southern blot analysis พบว่าทั้ง 7 โคลนมีชิ้นส่วนขนาด 0.9 kb ที่ homologous กัน ดังนั้น จึงเลือกโคลนที่มีขนาดเล็กที่สุด คือ 1.6 kb ตั้งชื่อว่า pEST5 เพื่อนำมาใช้ศึกษาต่อไป ข้อมูลจาก Southern blot โดยใช้ 0.9 kb เป็นตัวตรวจสอบกับโครโมโซมของ Xanthomonas ชนิดต่าง ๆ และพวกแบคทีเรียชนิดแท่งแกรมลบ ชนิดอื่น ๆ พิสูจน์ได้ว่า โคลนที่ได้นี้มาจาก Xanthomonas campestris pv. glycines แต่อย่างไรก็ตามพบว่า ยีน esterase มี homology ในอัตราที่สูงกับยีน esterase จาก Xanthomonas บางชนิด หลังจากนั้นนำโคลนที่ได้มาศึกษาหาตำแหน่งของ coding region พบว่าอยู่บน Fragment 1.3 kb และการ แสดงออกอยู่ภายใต้การควบคุมของ lacZ promoter นอกจาก นั้นข้อมูลเพิ่มเติมที่ได้จากการตรวจสอบ esterase activity ในอาหารเลี้ยงเชื้อที่ปั่นแยกเซลล์ออกแล้ว สามารถสรุป ได้ว่า ยีน esterase ที่ถูกคัดเลือกได้นี้สร้างเอนไซม์ที่ หลั่งออกนอกเซลล์ โดยเป็นคนละชนิดกับเอนไซม์ esterase ที่อยู่ภายในเซลล์ที่ศึกษามาก่อนแล้ว ในการศึกษาบทบาทของ ยีน esterase ที่มีต่อเซลล์จาก overexpression ของยีน esterase ใน Xanthomonas พบว่าไม่มีผลต่อการเพิ่ม ปริมาณการผลิตและไม่มีผลต่อการต่อต้านการเกิด oxidative stress แต่อย่างไรก็ตามหน้าที่ของ esterase ใน Xanthomonas campestris pv. glycines นั้นยังไม่เป็นที่ ทราบแน่ชัด

บรรณานุกรม :
อุไรวรรณ อินทมาโส . (2538). การศึกษายีน esterase ของเชื้อ Xanthomonas campestris pv. glycines.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
อุไรวรรณ อินทมาโส . 2538. "การศึกษายีน esterase ของเชื้อ Xanthomonas campestris pv. glycines".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
อุไรวรรณ อินทมาโส . "การศึกษายีน esterase ของเชื้อ Xanthomonas campestris pv. glycines."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2538. Print.
อุไรวรรณ อินทมาโส . การศึกษายีน esterase ของเชื้อ Xanthomonas campestris pv. glycines. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2538.