จากการทดลองเจือจางน้ำเชื้อปลาสวาย อัตราส่วนน้ำเชื้อ ต่อน้ำยาเท่ากับ 1 ต่อ 3 ในน้ำยา 21 สูตร เก็บรักษาในตู้เย็นที่ 0-6 องศาเซลเซียส นาน 6, 78 และ 150 ชั่วโมง ก่อนนำมา ตรวจคุณภาพน้ำเชื้อ (เปอร์เซ็นต์อสุจิเคลื่อนไหวและการปฏิสนธิ กับไข่ปลาสวาย) พบว่า น้ำยา 0.85%NaCl(282mOsm.kg(-1), pH 7.0) ให้ผลดีกว่าน้ำยาสูตรอื่นอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05) ลำดับรองลงมาคือ น้ำยา modified calcium-free Hanks balanced salt solution (C-F HBSS,294 mOsm.kg (-1), pH 7.0) จึงเลือกน้ำยาทั้งสองชนิดนี้เก็บรักษาน้ำเชื้อแบบแช่แข็ง โดยกำหนดให้มี DMSO 8, 10 หรือ 12% และ equilibration time 20 นาที ก่อนลดอุณหภูมิ (-10, -20 หรือ -30 องศาเซลเซียส) ถึง -80 องศาเซลเซียส แล้วเก็บษรักษาน้ำเชื้อแช่แข็งในถัง ไนโตรเจนเหลว (-196 องศาเซลเซียส) นาน 7 วัน เมื่อนำน้ำเชื้อ แช่แข็งออกมาละลายที่ 50 หรือ 70 องศาเซลเซียส เพื่อตรวจ เปอร์เซ็นต์อสุจิเคลื่อนไหวและการปฏิสนธิกับไข่ปลาดุกอุย พบว่า เปอร์เซ็นต์อสุจิเคลื่อนไหวและการปฏิสนธิไม่แตกต่างกัน (P>0.05) ระหว่างการใช้น้ำยา 0.85%NaCl หรือ C-F HBSS และอุณหภูมิที่ใช้ในการละลายน้ำเชื้อแช่แข็ง แต่อัตราการ เคลื่อนไหวและอัตราการปฏิสนธิของน้ำเชื้อแช่แข็งแปรปรวนไปตาม อัตราการลดอุณหภูมิอย่างมีนัยสำคัญยิ่งทางสถิติ (P<0.01) กล่าวคือ การลดอุณหภูมิ -10 องศาเซลเซียส/นาที ให้อัตราอสุจิเคลื่อนไหว 43.9(+,-)2.5% และอัตราการปฏิสนธิ 8.3(+,-)0.9%สูงกว่า (P<0.05)-20 องศาเซลเซียส/นาที หรือ -30 องศาเซลเซียส/นาที ซึ่งมีอัตราอสุจิเคลื่อนไหว 26.7(+,-)2.0 และ 18.9(+,-)1.9% และอัตราการปฏิสนธิ 3.9(+,-)0.5 และ 2.1(+,-)0.4% ตามลำดับอัตราการลด อุณหภูมิและน้ำเชื้อแช่แข็งในน้ำยาที่มี DMSO 8% ให้อัตราอสุจิ เคลื่อนไหวสูงกว่า DMSO 10 หรือ 12% อย่างมีนัยสำคัญ (P<0.05) แต่อัตราการปฏิสนธิของน้ำเชื้อแช่แข็งไม่มีความแตกต่างทางสถิติ การเติมสาร ATP ลงในน้ำยาที่เก็บรักษาน้ำเชื้อ หรือน้ำกลั่น ที่ใช้ตรวจสอบคุณภาพน้ำเชื้อ กระตุ้นให้เปอร์เซ็นต์อสุจิ เคลื่อนไหว และระยะเวลาเคลื่อนไหวของอสุจิสูงกว่าการใช้ ionophore หรือน้ำยา หรือน้ำกลั่นที่ไม่ได้ใส่ ATP อย่างมีนัยสำคัญ (P<0.05) จากการศึกษาอสุจิที่ผ่านการเก็บรักษา ในตู้เย็นและการแช่แข็งด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็คตรอนพบว่า เยื่อหุ้มเซลล์และออร์กาเนลของอสุจิจำนวนหนึ่งถูกทำลายเสียหาย และหลุดออกจากตัวอสุจิ