| ชื่อเรื่อง | : | การทำให้บริสุทธิ์และลักษณะสมบัติบางประการของไนเทรตตรีดักเทสจากไซยาโนแบคทีเรีย ~iAphanothecehalophytica~i ทนเค็ม |
| นักวิจัย | : | โสรายา ไทยวานิช |
| คำค้น | : | NITRATE REDUCTASE , PURIFICATION , CHARAC , 1 RIZATION , HALOTOLERANT CYANOBACTERIUM |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2547 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1082547000797 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | ไนเตรท เป็นแหล่งไนโตรเจนที่มีความสำคัญ และ เป็นแหล่งไนโตรเจนหลักสำหรับการเจริญในไซยาโนแบคทีเรีย ~iAphanothece halophytica~i เมื่อไนเตรทเข้าสู่เซลล์กระบวนการนำไนเตรทไปใช้ภายในเซลล์จะถูกควบคุมโดยเอนไซม์ไนเตรทรีดักเตส งานวิจัยนี้จึงทำการศึกษาการควบคุมการทำงานของไนเตรทรีดักเตสโดยความเค็มและแหล่งไนโตรเจน พบว่าในภาวะที่มีความเครียดของเกลือจะมีระดับแอคติวิตีของไนเตรทรีดักเตสลดลงเป็นครึ่งหนึ่งเมื่อเทียบกับสภาวะปกติ มีค่าแอคติวิตีจำเพาะเป็น 0.278 และ 0.14 ในสภาวะปกติและสภาวะเครียดตามลำดับ ในอาหารที่มีไนเตรทเป็นแหล่งไนโตรเจนจะให้ระดับแอคติวิตีของไนเตรททรีดักเตสสูงสุดเพื่อใช้เป็นแหล่งไนโตรเจนเมื่อเทียบกับการใช้ L-glutamine หรือ ammonium chlorideเป็นแหล่งไนโตรเจน ไนเตรทจึงเป็นเสมือนตัวเหนี่ยวนำให้มีการผลิตแอคติวิตีของไนเตรททรีดักเตสดังนั้นในอาหารที่ไม่มีไนเตรทจะมีผลต่อการยับยั้งแอคติวิตีของไนเตรททรีดักเตส ตำแหน่งของไนเตรททรีดักเตสในเซลล์ไซยาโนแบคทีเรีย ~iAphanothece halophytica~i โดยตรวจสอบแอคติวิตีของไนเตรทรีดักเตสพบมากที่สุดในส่วนไซโตพลาสซึมของเซลล์ ซึ่งเกี่ยวข้องกับการนำไนเตรทไปใช้เพื่อการเจริญเติบโตของเซลล์ ผลดังกล่าวสอดคล้องกับอัตราการเจริญเติบโตของ ~iA. halophytica~i ไนเตรทรีดักเตสถูกทำให้บริสุทธิ์ด้วย 4 ขั้นตอน ดังนี้ การปั่นเหวี่ยงที่มีแรงสูง, การตกตะกอนด้วยเกลือแอมโมเนียมซัลเฟตแล้วแยกด้วยโครโมโตกราฟฟีคอลัมน์ดีอีเออีโทโยเพิร์ล และโครโมโตกราฟฟีคอลัมน์ไบโอเจลไฮดรอกซีอะพาไตท์ล พบว่ามีแอคติวิตีคงเหลือ 15.7 เปอร์เซ็นต์และมีความบริสุทธิ์ขึ้น 406 เท่า น้ำหนักโมเลกุลหน่วยย่อยของเอนไซม์ มีน้ำหนักประมาณ 58,000 ไนเตรทรีดักเตสที่ถูกทำให้บริสุทธิ์มีค่าKm เป็น 465 (+,m)M และอัตราเร็วสูงสุดเป็น V max เป็น 32 nmol/min/mg protein และสามารถใช้ ferredoxin เป็นตัวให้อิเลคตรอนในทางกายภาพได้ การศึกษาผลของตัวยับยั้งพบว่า ~ip~i-Chloromercuribenzoate, Iodoacetamide, KCN มีผลยับยั้งการทำงานของไนเตรทรีดักเตสลงมากกว่า 80% ที่ความเข้มข้น 0.1 Mm และที่ความเข้มข้น 2.5 mM ของ N-Ethylmaleimideและเมื่อใช้สารที่มีโครงสร้างคล้ายสับสเตรท คือ CIO(,3) พบว่า มีผลยับยั้งการทำงานของไนเตรทรีดักเตสเช่นกัน ขณะที่ผลผลิตของไนเตรทรีดักเตส, NaNO(,2) ไม่มีผลต่อการยับยั้งการทำงานของไนเตรทรีดักเตส |
| บรรณานุกรม | : |
โสรายา ไทยวานิช . (2547). การทำให้บริสุทธิ์และลักษณะสมบัติบางประการของไนเทรตตรีดักเทสจากไซยาโนแบคทีเรีย ~iAphanothecehalophytica~i ทนเค็ม.
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. โสรายา ไทยวานิช . 2547. "การทำให้บริสุทธิ์และลักษณะสมบัติบางประการของไนเทรตตรีดักเทสจากไซยาโนแบคทีเรีย ~iAphanothecehalophytica~i ทนเค็ม".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. โสรายา ไทยวานิช . "การทำให้บริสุทธิ์และลักษณะสมบัติบางประการของไนเทรตตรีดักเทสจากไซยาโนแบคทีเรีย ~iAphanothecehalophytica~i ทนเค็ม."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2547. Print. โสรายา ไทยวานิช . การทำให้บริสุทธิ์และลักษณะสมบัติบางประการของไนเทรตตรีดักเทสจากไซยาโนแบคทีเรีย ~iAphanothecehalophytica~i ทนเค็ม. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2547.
|
