ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การโคลนและศึกษาลักษณะสมบัติของไคติเนสจาก ~iBacillus licheniformis~i RN01 และการศึกษาเปรียบเทียบกับไคติเนสชนิดอื่น

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การโคลนและศึกษาลักษณะสมบัติของไคติเนสจาก ~iBacillus licheniformis~i RN01 และการศึกษาเปรียบเทียบกับไคติเนสชนิดอื่น
นักวิจัย : สุรเกติ์ เนาสราญวงศ์
คำค้น : CHITINASE , ~iBacillus licheniformis~i RN01 , CLONING , CHARACTERIZATION , COMPARATIVE STUDY
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2547
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1082547000804
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

ไคติเนส (EC 3.2.1.14) เป็นเอนไซม์ในกลุ่มไกลโคซิลไฮโดรเลสที่เร่งปฏิกิริยาการย่อยสลายไคติน ~iBacillus licheniformis~i RN01 ที่แยกได้จากแหล่งน้ำพุร้อนจังหวัดระนอง ผลิตเอนไซม์ไคนิเนสได้สูงสุดในวันที่ 2 เมื่อเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเชื้อcolloidal chitin minimum medium เอนไซม์ที่ผลิตได้สามารถทำงานได้ดีในช่วง pH ตั้งแต่pH 6 - 10 และเอนไซม์ทำงานได้ดีที่อุณหภูมิ 50 60 (+,ฐ)C สับสเตรทที่เอนไซม์ย่อยได้ดีที่สุดคือ PNAC (partial-N-acetylated chitin) รองลงมาคือ คอลลอยด์ดัลไคติน,(+,b)-ไคติน และ powder chitin ตามลำดับ ผลิตภัณฑ์ที่ได้จากการย่อยคอลลอยด์ดัลไคตินได้chitobiose เป็นผลิตภัณฑ์หลัก เมื่อทำการแยกโปรตีนโดย SDS-PAGE และย้อมแอคติวิตีพบโปรตีนที่มีไคติเนสแอคติวิตี 3 แถบที่มีขนาดต่าง ๆ คือ 70, 65 และ 58 กิโลดาลตันตามลำดับ เมื่อนำ genomic DNA ของ ~iBacillus licheniformis~i RN01 มาโคลนยีนไคติเนสโดยวิธี PCR cloning พบว่า DNA ที่โคลนได้มีนิวคลีโอไทด์ทั้งหมด 1,964 นิวคลีโอไทด์ สามารถtranslate ออกมาเป็นกรดอะมิโนได้ 598 กรดอะมิโน ซึ่งมีขนาดประมาณ 66,134 ดาลตัน (Da)มี isoelectric point เท่ากับ 5.17 เอนไซม์ไคติเนสที่โคลนได้ให้ชื่อว่า ChiRN1 พบว่าเอนไซม์ที่โคลนได้ประกอบด้วยโดเมน 3 โดเมน ได้แก่ catalytic domain (CatD), fibronectintype III-like domain (FnIIID) และ chitin binding domain (ChBD) เมื่อทำการศึกษาสมบัติบางประการของเอนไซม์ ChiRN1 พบว่าเอนไซม์สามารถทำงานได้ดีในช่วง pH ตั้งแต่ pH 6 -10 อุณหภูมิที่เอนไซม์ทำงานได้ดีอยู่ที่ 60 - 70 (+,ฐ)C สับสเตรตที่เอนไซม์ย่อยได้ดีที่สุดคือ PNAC รองลงมาคือ คอลลอยด์ดัลไคติน และ (+,b)-ไคติน ผลจาก SDS-PAGE และย้อมสีแอคติวิตีพบแถบโปรตีนที่มีไคติเนสแอคติวิตี 3 แถบ มีขนาด 70, 65 และ 58 kDa เหมือนกับ ~iB. licheniformis~iRN01 และพบว่าผลิตภัณฑ์ที่ได้จากการย่อยสลายคอลลอยด์ดัลไคตินได้ chitobiose เป็นผลิตภัณฑ์หลักและเมื่อทำไคติเนสลูกผสมโดยนำเอาส่วน FnIIID และ ChBD ของ ChiRN1 ไปต่อข้างหลังเอนไซม์Chi60 ที่มี 2 โดเมน ได้แก่ N-terminal domain และ catalytic domain พบว่าเอนไซม์ลูกผสมมีกรดอะมิโนจำนวน 708 กรดอะมิโน ผลิตภัณฑ์ที่ได้จากการย่อยสลายคอลลอยด์ดัลไคตินด้วยเอนไซม์ลูกผสมเป็น chitobiose เพียงอย่างเดียว เช่นเดียวกับเอนไซม์ Chi60 สรุปได้ว่า FnIIId และChBD ที่ต่อเพิ่มไปบนเอนไซม์ Chi60 ไม่เปลี่ยนแปลงอัตราส่วนระหว่าง monomer และ dimer ของผลิตภัณฑ์

บรรณานุกรม :
สุรเกติ์ เนาสราญวงศ์ . (2547). การโคลนและศึกษาลักษณะสมบัติของไคติเนสจาก ~iBacillus licheniformis~i RN01 และการศึกษาเปรียบเทียบกับไคติเนสชนิดอื่น.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
สุรเกติ์ เนาสราญวงศ์ . 2547. "การโคลนและศึกษาลักษณะสมบัติของไคติเนสจาก ~iBacillus licheniformis~i RN01 และการศึกษาเปรียบเทียบกับไคติเนสชนิดอื่น".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
สุรเกติ์ เนาสราญวงศ์ . "การโคลนและศึกษาลักษณะสมบัติของไคติเนสจาก ~iBacillus licheniformis~i RN01 และการศึกษาเปรียบเทียบกับไคติเนสชนิดอื่น."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2547. Print.
สุรเกติ์ เนาสราญวงศ์ . การโคลนและศึกษาลักษณะสมบัติของไคติเนสจาก ~iBacillus licheniformis~i RN01 และการศึกษาเปรียบเทียบกับไคติเนสชนิดอื่น. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2547.