ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

รูปแบบของ restriction fragment Iength polymorphism (RFLP) ในส่วน ribosomalDNA ของ ~iCandida~i spp. จาก โรงพยาบาลจุฬาลงกรณ์

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : รูปแบบของ restriction fragment Iength polymorphism (RFLP) ในส่วน ribosomalDNA ของ ~iCandida~i spp. จาก โรงพยาบาลจุฬาลงกรณ์
นักวิจัย : กมลรัตน์ โพธิ์ปิ่น
คำค้น : CANDIDA SPECIES , RFLP , rDNA , ITS , IDENTIFICATION
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2546
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1082546001148
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์ เพื่อศึกษารูปแบบของ PCR-RFLP ในส่วน rDNA ของ~iCandida~i spp. ที่เพิ่มจำนวนขึ้นโดยใช้ ITS1 และ ITS4 primer และใช้เอนไซม์ตัดจำเพาะตัด PCR products ในการจัดจำแนกเชื้อ ~iCandida~i spp. การศึกษาครั้งนี้ใช้วิธีการเพิ่มจำนวนของสารพันธุกรรมในส่วนของ ITS-rDNA จากตัวอย่างทั้งหมด120 ตัวอย่างที่ได้จากสิ่งส่งตรวจทางคลีนิค จากการศึกษาพบว่าเชื้อ ~iCandida~i ที่ให้ขนาดของ PCR products ที่จำเพาะแตกต่างจากเชื้อตัวอื่นได้แก่ ~iC. glabrata~i(875 bp) และ ~iC. guilliermondii~i (608 bp) ส่วนเชื้อ ~iCandida~i อื่น ๆให้ขนาดของ PCR products ประมาณ 500 bp [(C. ~ialbicans~i (536 bp), ~iC. tropicalis~i(523 bp), ~iC. parapsilosis~i (521 bp), ~iC. dubliniensis~i (541 bp) และ~iC. krusei~i (510 bp)] จึงจำเป็นต้องศึกษารูปแบบของ RFLP จาก PCR productsโดยใช้เอนไซม์ตัดจำเพาะ ~iHae~i III, ~iDde~i I และ ~iTru9~i I ผลการศึกษาพบว่าจากรูปแบบ PCR-RFLP ของตัวอย่างทั้งหมด 120 ตัวอย่าง เทียบกับเชื้อมาตรฐานสามารถจำแนกได้เป็น ~iC. albicans~i จำนวน 55 ตัวอย่าง (ร้อยละ 45.8), ~iC. tropicalis~iจำนวน 26 ตัวอย่าง (ร้อยละ 21.7), ~iC. parapsilosis~i จำนวน 19 ตัวอย่าง(ร้อยละ 15.8), ~iC. glabrata~i จำนวน 9 ตัวอย่าง (ร้อยละ 7.5), ~iC. dubliniensis~iจำนวน 6 ตัวอย่าง (ร้อยละ 5.0), ~iC. guilliermondii~i จำนวน 3 ตัวอย่าง (ร้อยละ 2.5)และ ~iC. krusei~i จำนวน 2 ตัวอย่าง (ร้อยละ 1.6) เมื่อทำการจำแนกชนิดด้วยวิธีดั้งเดิม (Conventional Methods) และวิธีทางอณูชีววิทยา (PCR-RFLP) สามารถจำแนกเชื้อได้ผลตรงกัน จำนวน 114 ตัวอย่าง จาก 120 ตัวอย่าง คิดเป็นร้อยละ 95 ส่วนตัวอย่างที่ผลการจำแนกชนิดไม่ตรงกันอีก 6 ตัวอย่างนั้นโดยวิธีดั้งเดิมให้ผลเป็น ~iC. albicans~iขณะที่วิธี PCR-RFLP เป็น ~iC. dubliniensis~i จากการศึกษารูปแบบของ PCR-RFLP ด้วย~iHae~i III และ ~iDde~i I ให้ผลสอดคล้องกับรูปแบบที่ได้จากเชื้ออ้างอิง สำหรับผลจากเอนไซม์ ~iTru9~i I ของเชื้อจำนวน 40 ตัวอย่าง ที่จัดจำแนกด้วยวิธีดั้งเดิมและวิธี PCR-RFLP ของเอนไซม์ 2 ชนิดข้างต้นได้เป็น ~iC. albicans~i นั้น ได้รูปแบบที่ต่างจากรูปแบบของรูปแบบของ ~iC. albicans~i ที่เป็นเชื้ออ้างอิง จึงได้ตรวจสอบด้วยเอนไซม์ ~iMbo~i I พบว่า ทั้งหมดมีรูปแบบเช่นเดียวกับรูปแบบของ ~iC. albicans~iที่เป็นเชื้ออ้างอิง การเกิดรูปแบบใหม่ของ PCR-RFLP อาจเนื่องจากการกลายพันธุ์ที่ตำแหน่งต่าง ๆ ในลำดับเบส ที่ตรงกับ recognition site ของ ~iTru9~i I ผลการศึกษาในครั้งนี้พบว่า การจำแนกเชื้อ ~iCandida~i ด้วยวิธี PCR-RFLP ในส่วน rDNA นั้นให้ความรวดเร็ว มีความถูกต้องและแม่นยำสูงในการจำแนกเชื้อ ~iCandida~i spp.ที่มีความสำคัญทางการแพทย์

บรรณานุกรม :
กมลรัตน์ โพธิ์ปิ่น . (2546). รูปแบบของ restriction fragment Iength polymorphism (RFLP) ในส่วน ribosomalDNA ของ ~iCandida~i spp. จาก โรงพยาบาลจุฬาลงกรณ์.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
กมลรัตน์ โพธิ์ปิ่น . 2546. "รูปแบบของ restriction fragment Iength polymorphism (RFLP) ในส่วน ribosomalDNA ของ ~iCandida~i spp. จาก โรงพยาบาลจุฬาลงกรณ์".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
กมลรัตน์ โพธิ์ปิ่น . "รูปแบบของ restriction fragment Iength polymorphism (RFLP) ในส่วน ribosomalDNA ของ ~iCandida~i spp. จาก โรงพยาบาลจุฬาลงกรณ์."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2546. Print.
กมลรัตน์ โพธิ์ปิ่น . รูปแบบของ restriction fragment Iength polymorphism (RFLP) ในส่วน ribosomalDNA ของ ~iCandida~i spp. จาก โรงพยาบาลจุฬาลงกรณ์. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2546.