| ชื่อเรื่อง | : | ผลของชนิดของฟีดเดอร์เซลล์และอาหารที่ใช้ในการรีเจนเนอเรท ที่มีต่อการถ่ายยีนด้วย~iAgrobacterium tumefaciens~i เข้าสู่มะเขือเทศพันธุ์สีดาทิพย์ และสวีทเชอรี่(~iLycopersicon esculentum~i Mill. cultivar Seedatip AND Sweet Cherry) |
| นักวิจัย | : | สายสุนี แก้วเทศ |
| คำค้น | : | TOMOTO , ~iAgrobacterium tumefaciens~i. , ~iNPT ll~i , GENE , POLYMERASECHAIN REACTION |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2545 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1082545000165 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | การเตรียมฟีดเดอร์เซลล์จากแคลลัสของยาสูบ ที่ได้จากแผ่นใบที่เลี้ยงในอาหาร MSที่เติม 2,4-D 0.1 mg/l พบว่า แคลลัสที่เจริญในอาหารดังกล่าวมีลักษณะแตกต่างกันคอมแพกแคลลัสสีเขียวและสีขาวสามารถเจริญเป็นยอดได้ ในอาหาร KDMS ในเวลา80 วัน ในขณะที่ไฟรเอเบิลแคลลัสที่มีลักษณะเซลล์ใสไม่มีสีเขียว เปลี่ยนเป็นสีน้ำตาลและตายไปในที่สุด เมื่อนำคอมแพกแคลลัสสีเขียวและสีขาวนี้มาเลี้ยงในอาหารเหลวสูตรMS ที่เติม 2,4-D 0.1 mg/l พบว่า ได้เซลล์แขวนลอยสีเหลืองอมเขียวที่เพิ่มปริมาณได้และมีขนาดเล็ก กระจายตัวดี เมื่อย้ายเซลล์แขวนลอยนี้มาเลี้ยงในอาหารเหลวสูตร MSที่เติม IAA 0.1 mg/l และ kinetin 1.0 mg/l พบว่า เซลล์แขวนลอยเจริญเติบโตเป็นกลุ่มเซลล์มีขนาดใหญ่ขึ้นและเปลี่ยนเป็นสีน้ำตาล ซึ่งผลที่ได้ต่างจากการย้ายคอมแพกแคลลัสสีเขียวและสีขาวมาเลี้ยงในอาหารเหลวสูตร MS ที่เติม IAA 0.1 mg/l และ kinetin 1.0 mg/lโดยตรงที่พบว่า แคลลัสให้เซลล์แขวนลอยน้อย แต่มีการรีเจนเนอเรทเป็นยอดจำนวนมากจึงไม่เหมาะสมที่จะนำมาใช้เป็นฟีดเดอร์เซลล์ สำหรับการเลี้ยงแคลลัสจากแผ่นใบพิทูเนียในอาหาร MS ที่เติม 2,4-D 1.0 mg/l พบว่าได้แคลลัสสีเขียวอมเหลือง ลักษณะเซลล์ค่อนข้างละเอียด เมื่อนำมาเลี้ยงในอาหาร medium Bสามารถเกิดการรีเจนเนอเรทเป็นยอดได้ดี และเมื่อนำแคลลัสมาเลี้ยงในอาหารเหลว medium Pพบว่าได้เซลล์แขวนลอยสีเขียวอมเหลืองลักษณะเซลล์ละเอียด และกระจายตัวดี ซึ่งสามารถใช้เป็นฟีดเดอร์เซลล์ได้ จากการศึกษาวิธีการถ่ายยีนเข้าสู่มะเขือเทศพันธุ์สีดาทิพย์และสวีทเชอรีรวม 18 การทดลองโดยใช้ ~iAgrobacterium tumefaciens~i สายพันธุ์ LBA 4404 ซึ่งมีพลาสมิด pBl121 ที่มี~igus~i gene เป็นยีนรายงานผล และ ~inpt~i II gent เป็นยีนเครื่องหมายสำหรับการคัดเลือกพบว่า ใบเลี้ยงของมะเขือเทศพันธุ์สีดาทิพย์ขยายขนาดได้ดีที่สุดเมื่อใช้เซลล์แขวนลอยพิทูเนียเป็นฟีดเดอร์โดยทำ preculture ด้วยเป็นเวลา 1 คืน และเลี้ยงบน regenerationMedium III รองลงมาคือ การใช้เซลล์แขวนลอยยาสูบที่เลี้ยงในอาหาร MS ที่เติม IAA 0.1 mg/lและ kinetin 1.0 mg/l เป็นฟีดเดอร์โดยไม่ทำ preculture และเลี้ยงบน regeneration medium IIส่วนใบเลี้ยงมะเขือเทศพันธุ์สวีทเชอรี่ขยายขนาดได้ดีที่สุดเมื่อใช้เซลล์แขวนลอยพิทูเนียเป็นฟีดเดอร์ และเลี้ยงบน regeneration medium I รองลงมาคือ การใช้เซลล์แขวนลอยยาสูบที่เลี้ยงในอาหาร MS ที่เติม IAA 0.1 mg/l และ kinetin 1.0 mg/l เป็นฟีดเดอร์และเลี้ยงบนregeneration medium II ทั้งนี้การ preculture และไม่ preculture ให้ผลไม่แตกต่างกันทางสถิติ ส่วนประสิทธิภาพในการถ่ายยีนเข้าสู่มะเขือเทศทั้ง 2 พันธุ์ จากทั้ง 18 การทดลองพบว่า มะเขือเทศพันธุ์สีดาทิพย์ และพันธุ์สวีทเชอรี่มีค่า pupative transformation efficiency เป็น 2.5-18.0% และ 5.6-22.2% ตามลำดับ ต้นมะเขือเทศที่คาดว่าจะเป็นต้นที่ได้รับการถ่ายยีนได้ถูกนำมาตรวจสอบเอนไซม์กลูคูโรนิเดส โดยวิธี histochemical detection และโดยการเพิ่มชิ้นส่วนของยีน ~inpt~i IIโดยใช้ไพร์เมอร์จำเพาะ ซึ่งพบว่าพืชทุกต้นที่นำมาตรวจสอบให้ผลบวกในการตรวจสอบยีนทั้งสอง การทดลองนี้ยืนยันประสิทธิภาพการถ่ายยีนว่าเป็นดังที่ระบุไว้ข้างต้น |
| บรรณานุกรม | : |
สายสุนี แก้วเทศ . (2545). ผลของชนิดของฟีดเดอร์เซลล์และอาหารที่ใช้ในการรีเจนเนอเรท ที่มีต่อการถ่ายยีนด้วย~iAgrobacterium tumefaciens~i เข้าสู่มะเขือเทศพันธุ์สีดาทิพย์ และสวีทเชอรี่(~iLycopersicon esculentum~i Mill. cultivar Seedatip AND Sweet Cherry).
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. สายสุนี แก้วเทศ . 2545. "ผลของชนิดของฟีดเดอร์เซลล์และอาหารที่ใช้ในการรีเจนเนอเรท ที่มีต่อการถ่ายยีนด้วย~iAgrobacterium tumefaciens~i เข้าสู่มะเขือเทศพันธุ์สีดาทิพย์ และสวีทเชอรี่(~iLycopersicon esculentum~i Mill. cultivar Seedatip AND Sweet Cherry)".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. สายสุนี แก้วเทศ . "ผลของชนิดของฟีดเดอร์เซลล์และอาหารที่ใช้ในการรีเจนเนอเรท ที่มีต่อการถ่ายยีนด้วย~iAgrobacterium tumefaciens~i เข้าสู่มะเขือเทศพันธุ์สีดาทิพย์ และสวีทเชอรี่(~iLycopersicon esculentum~i Mill. cultivar Seedatip AND Sweet Cherry)."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2545. Print. สายสุนี แก้วเทศ . ผลของชนิดของฟีดเดอร์เซลล์และอาหารที่ใช้ในการรีเจนเนอเรท ที่มีต่อการถ่ายยีนด้วย~iAgrobacterium tumefaciens~i เข้าสู่มะเขือเทศพันธุ์สีดาทิพย์ และสวีทเชอรี่(~iLycopersicon esculentum~i Mill. cultivar Seedatip AND Sweet Cherry). กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2545.
|
