| ชื่อเรื่อง | : | การย่อยสลายสารเพนทาคลอโรฟีนอลโดยสายพันธุ์กลายของ ~iSphingomonas chlorophenolica~i ATCC 39723. |
| นักวิจัย | : | พนารัตน์ อรุณรัติยากร |
| คำค้น | : | ~iSphingomonas chlorophenolica~i ATCC 39723 , pentachlorophenol , ~ipcpD gene~i , site directed insertion mutagenesis , homologous recombination |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2542 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1082542001285 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | การกลายพันธุ์โดยการสอดแทรกที่บริเวณจำเพาะในจีโนม (Site-directed insertion mutagenesis)ถูกนำมาใช้ในการศึกษาถึงบทบาทของยีน pcpD ต่อการย่อยสลายสารเพนทาคลอโรฟีนอล ในShpingomonas chlorophenolica ATCC 39723 โดยสร้างเวคเตอร์เป้าหมายสำหรับขัดขวางการทำงานของยีน ~ipcpD~i (ในจีโนม ของ ~iS. chlorophenolica~i) ซึ่งเป็นพลาสมิดลูกผสมของ pUC 19 ที่มีชิ้นส่วนของยีส pcpD ที่ถูกสอดแทรกด้วยยืนต้านยาคานามัยซิน เมื่อทำการถ่ายโอนเวคเตอร์เป้าหมายเข้าไปในเซลล์ของ ~iS. chlorophenolica~i ทำให้เกิดการแลกเปลี่ยนสายดีเอนเอระหว่างจีโนมและเวคเตอร์เป้าหมายในบริเวณที่มีลำดับเบสเหมือนกัน (homologous recombination) ซึ่งเป็นบริเวณยีน~ipcpD~i ทำให้เกิดการสอดแทรกของชิ้นยีนต้านยาคานามัยซินเข้าไปในจีโนม เกิดเป็นสายพันธุ์กลายที่มีการกลายของยีน ~ipcpD~i และสามารถต้านยาคานามัยซินได้ จากผลการทดลอง หลังจากทำการถ่ายโอนเวคเตอร์เป้าหมายเข้าไปในเซลล์ ของ~iS.chlorophenolica~i และทำการคัดเลือกสายพันธุ์กลายในอาหารที่มียาคานามัยซิน สามารถพบโคโลนีได้หลังจากทำการบ่มไว้ 3 วัน นำโคโลนีที่สามารถต้านยาคานามัยซินได้ 27 โคโลนีมาทำการศึกษาต่อ จากการวิเคราะห์ดีเอนเอด้วย Southern blot พบว่าให้แถบสัญญาณกับตัวติดตามที่เป็นชิ้นส่วนของยีน ~ipcpD~i แต่ไม่แสดงแถบสัญญาณกับตัวติดตามที่เป็นชิ้นส่วนของยีนต้านยาคานามัยซิน ดังนั้นทุกโคโลนีเป็นสายพันธุ์กลายของ ~iS. chlorophenolica~i ที่ไม่มีการสอดแทรกของชิ้นยีนต้านยาเข้าไปในจีโนมแต่สามารถต้านยาคานามัยซินได้ และไม่พบเวคเตอร์เป้าหมายหลังจากทำการสกัดแยกพลาสมิดในสายพันธุ์กลาย เมื่อทำการทดสอบความสามารถในการย่อยสลายสารเพนทาคลอโรฟีนอลพบว่า ภายในเวลา 2 ชั่วโมงสามารถลดปริมาณเพนทาคลอโรฟีนอลได้ 25-99 เปอร์เซ็นต์ ในขณะที่สายพันธุ์ปกติสามารถย่อยสลายได้อย่างสมบูรณ์ |
| บรรณานุกรม | : |
พนารัตน์ อรุณรัติยากร . (2542). การย่อยสลายสารเพนทาคลอโรฟีนอลโดยสายพันธุ์กลายของ ~iSphingomonas chlorophenolica~i ATCC 39723..
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. พนารัตน์ อรุณรัติยากร . 2542. "การย่อยสลายสารเพนทาคลอโรฟีนอลโดยสายพันธุ์กลายของ ~iSphingomonas chlorophenolica~i ATCC 39723.".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. พนารัตน์ อรุณรัติยากร . "การย่อยสลายสารเพนทาคลอโรฟีนอลโดยสายพันธุ์กลายของ ~iSphingomonas chlorophenolica~i ATCC 39723.."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2542. Print. พนารัตน์ อรุณรัติยากร . การย่อยสลายสารเพนทาคลอโรฟีนอลโดยสายพันธุ์กลายของ ~iSphingomonas chlorophenolica~i ATCC 39723.. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2542.
|
