| ชื่อเรื่อง | : | เทคนิคแบบใหม่สำหรับประเมินหาปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระ |
| นักวิจัย | : | มะลิวรรณ อมตธงไชย |
| คำค้น | : | Amperometry , antioxidant , Carbon Nanotube , chemiluminescence , Luminol , คาร์บอนนาโนทิวป์ , ลูมินอล , สารต้านอนุมูลอิสระ , เคมิลูมิเนสเซนต์ , แอมเพอร์โรเมทรี |
| หน่วยงาน | : | สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2556 |
| อ้างอิง | : | http://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=MRG5080176 , http://research.trf.or.th/node/6302 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | งานวิจัยนี้ประกอบด้วยสองส่วน ในส่วนแรกได้พัฒนาเทคนิควิเคราะห์แอมเปอร์โรเมทรีแบบใหม่เพื่อใช้ในการประเมินหาปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระ โดยอาศัยการวัดปฏิกิริยาของสารอนุมูลอิสระ 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) ที่ขั้วไฟฟ้ากลาสซีคาร์บอนที่โมดิฟายด์ด้วยคาร์บอนนาโนทิวบ์ (CNT/GC) ไซคลิกโวลแทมโมแกรมของสารต้านอนุมูลอิสระที่สนใจเช่น catechin, quercetin, gallic acid และ caffeic acid ได้ศึกษาในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.4 ที่มี KCl ความเข้มข้น 0.03 M และเอทานอล 40% ได้เปรียบเทียบผลการทดลองระหว่างการใช้ขั้วไฟฟ้าแบบกลาสซีคาร์บอน (GC) ธรรมดาและที่โมดิฟายด์ด้วยคาร์บอนนาโนทิวบ์ (CNT/GC) พบว่าไซคลิกโวลแทมโมแกรมที่ได้จากทั้งขั้วไฟฟ้า GC และ CNT/GC ให้พีคออกซิเดชันของสารต้านอนุมูลอิสระที่สนใจที่ชัดเจน แต่ในขั้วไฟฟ้า CNT/GC มีสภาพไวที่สูงกว่าในขั้วไฟฟ้า GC (ประมาณ 8-30 เท่า) ในการวัดปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระแบบแอมเปอร์โรเมทรีจะติดตามปริมาณของสารอนุมูลอิสระ (DPPH) ที่เหลือจากการทำปฏิกิริยากับสารต้านอนุมูลอิสระ การวัดปริมาณของสารต้านอนุมูลอิสระจึงวัดได้จากการลดลงของสัญญาณจาก DPPH ได้นำวิธีการนี้ไปประยุกต์ใช้กับเทคนิคโฟลอินเจคชันอะนาลิซิสเพื่อใช้เป็นเทคนิควิเคราะห์ในการประเมินหาปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระรวม (TAC) ผลการทดลองพบว่าเทคนิคที่ได้พัฒนาขึ้นให้กราฟมาตรฐานที่ป็นเส้นตรงในช่วงที่กว้างในสารต้านอนุมูลอิสระที่นำมาทดสอบ โดยมีขีดจำกัดในการวิเคราะห์ในระดับที่ต่ำถึงไมโครโมลาร์ งานวิจัยในส่วนที่สองได้พัฒนาวิธีที่รวดเร็วในการวิเคราะห์หาปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระโดยใช้เทคนิคการไหลระดับไมโคร ในการวิเคราะห์จะอาศัยปฏิกิริยาเคมิลูมิเนสเซนต์ที่มีสารประกอบโคบอลต์/อีดีทีเอ (Co(II) /EDTA) เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาระหว่างลูมินอลและไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ได้ออกแบบระบบวิเคราะห์โดยจะตรวจวัดสัญญาณของแสงที่เกิดจากปฏิปฏิกิริยาเคมิลูมิเนสเซนต์อย่างต่อเนื่อง ค่าความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระโดยรวมของสารตัวอย่างวิเคราะห์ได้จากสัญญาณที่ลดลง เนื่องจากสารต้านอนุมูลอิสระจะเข้าทำปฏิกิริยากับไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์/ไฮดรอกซิลแรดิคัลส่งผลให้แสงที่วัดได้มีค่าลดลง ระบบที่พัฒนาขึ้นนี้เป็นระบบวิเคราะห์ที่มีความเที่ยงสูง(%RSD = 0.73) ใช้ปริมาณสารเคมีน้อย (~150 L/การวิเคราะห์) สามารถวิเคราะห์ได้อย่างรวดเร็ว (~180 ตัวอย่าง/ชั่วโมง) และเหมาะสมสำหรับใช้เป็นระบบตรวจวัดปริมาณของสารอนุมูลอิสระในตัวอย่างจริง ระบบที่พัฒนาขึ้นนี้สามารถนำไปประยุกต์ใช้ตรวจวัดปริมาณของสารอนุมูลอิสระในตัวอย่างสารสกัดจากผัก พืชสมุนไพร และผลไม้ต่าง ๆ ที่มีจำหน่ายในประเทศไทย This work consists of two parts. In the first part, a new approach for evaluation of Total Antioxidant Capacity (TAC) based on the amperometric detection of 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) at a carbon nanotubes-modified glassy carbon (CNT/GC) electrode was carried out. Electrochemical oxidations of DPPH and antioxidants, for examples catechin, quercetin, gallic acid, trolox and caffeic acid, were studied at the CNT/GC electrode using cyclic voltammetry and amperometric techniques. The cyclic voltammograms (CVs) of these compounds were firstly investigated in 40% ethanol-water solution containing 0.03 M KCl in 0.03 M phosphate buffer, pH 7.4. Comparison experiments were performed with glassy carbon (GC) electrode. Both of the GC and CNT/GC electrodes offer well-defined oxidation waves for all tested antioxidants. However, the CNT/GC provides a better sensitivity than GC electrode (8-30 times). The results from amperometry indicated that CNT/GC enable very sensitive and stable amperometric measurements of DPPH free radical. Capacities of the tested antioxidants were evaluated by amperometric detection of the residual concentration of non-reacted free radical. A simple amperometric detector for evaluation of TAC was constructed and applied to flow injection analysis (CNT/GC-FI). Wide linear calibration curves were observed for all tested antioxidants. The detection limits at a low M level were obtained. In the second part of this work, a high throughput screening (HTS) system for assaying TAC is developed using microfluidic technology. The indicator reaction was adopted from a catalytic effect of Co(II)/EDTA complex on chemiluminescence (CL) reaction between hydrogen peroxide (H2O2) and luminol. Specifically, the system is based on the continuous monitoring and detection of a loss in chemiluminescence, which is related to the total scavenging capacity of a sample solution towards H2O2 and HO•. The HTS system yields outstanding measurement precision (%RSD = 0.73) and processes minute volumes of reagents (~150 L/analysis). Moreover, the system offers high sample throughput (~180 injections/hour) and therefore suited for mass screening of real-world samples. This method was successfully applied to evaluate antioxidant contents in some plant extracts such as Thai indigenous vegetables/herbs and generic fruit available in Thai markets. |
| บรรณานุกรม | : |
มะลิวรรณ อมตธงไชย . (2556). เทคนิคแบบใหม่สำหรับประเมินหาปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระ.
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย. มะลิวรรณ อมตธงไชย . 2556. "เทคนิคแบบใหม่สำหรับประเมินหาปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระ".
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย. มะลิวรรณ อมตธงไชย . "เทคนิคแบบใหม่สำหรับประเมินหาปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระ."
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย, 2556. Print. มะลิวรรณ อมตธงไชย . เทคนิคแบบใหม่สำหรับประเมินหาปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระ. กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย; 2556.
|
