| ชื่อเรื่อง | : | การทำโคลนนิ่ง การแสดงออกและการสกัดบริสุทธิ์ของแอลฟากลูโคซิเดสชนิดที่ 3 ของผึ้งโพรง (Apis cerana) |
| นักวิจัย | : | จันทร์เพ็ญ จันทร์เจ้า |
| คำค้น | : | การแสดงของยีน , ผึ้งโพรงไทย , ยีสต์ , เอนไซม์แบบรีคอมบิแนนท์ , แอลฟากลูโคซิเดส |
| หน่วยงาน | : | สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2554 |
| อ้างอิง | : | http://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=RMU5180042 , http://research.trf.or.th/node/5379 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | ในงานวิจัยนี้ มุ่งเน้นที่ recombinant HBGase I, II และ III จากผึ้งโพรงไทย (Apis cerana indica) ซึ่งเป็นผึ้งเศรษฐกิจอย่างหนึ่ง ในการตรวจสอบรูปแบบการแสดงออกของยีน ทำการเก็บตัวอย่างผึ้งที่อยู่ในระยะการเจริญต่างๆ ได้แก่ ระยะไข่ ตัวอ่อน ดักแด้และตัวเต็มวัยพบว่ายีน HBGase I และ III มีการแสดงออกสูงสุดในผึ้งตัวเต็มวัยที่เป็นผึ้งออกหาอาหาร ส่วนHBGase II มีการแสดงออกสูงสุดในผึ้งระยะตัวอ่อนและดักแด้ แต่มีระดับการแสดงออกในระยะตัวเต็มวัยที่น้อยกว่าและไม่มีการแสดงออกเลยในระยะไข่ จากการค้นหาลำดับนิวคลีโอไทด์ที่ยาวเต็มสายของยีน ได้ส่วนปลายสายของ HBGase III ในส่วนของ HBGase I ได้ลำดับนิวคลีโอไทด์บางส่วนที่มีความยาว 942 bp และในส่วนของ HBGase II ได้ลำดับนิวคลีโอไทด์บางส่วนที่มีความยาว 834 bp เมื่อมาพิจารณาที่ความเหมือนของลำดับนิวคลีโอไทด์ พบว่าลำดับนิวคลีโอไทด์ของ HBGase I มีความเหมือนกับยีนดังกล่าวของ A. cerana japonica isozyme I (NM_AB260890.1) ถึง 98% ในขณะที่ลำดับนิว คลีโอไทด์ของ HBGase II มีความเหมือนกับยีนดังกล่าวของ A. cerana japonica isozyme II (NM_FJ752630.1) ถึง 100% ต่อมาทำการโคลน HBGase III (ความยาวของยีนเต็มสาย 1,704 bp) เข้าสู่ pPICZαA (ซึ่งเป็น expression vector) แล้วทำการ transform เข้าสู่ยีสต์ Pichia pastoris GS115 พบว่า recombinant HBGase III มีการแสดงออกสูงสุดเมื่อถูก induce ด้วย 1% methanol เป็นเวลา 144 ชั่วโมง (7 วัน) ได้ activity ของ HBGase III ที่หลั่งออกนอกเซลล์ 6 U จากการเลี้ยงยีสต์ที่ 1.2 ลิตร นอกจากนี้ยังพบว่าเอนไซม์ดังกล่าวมี pH activity, pH stability, และ thermal stability ที่ 5.0, 4.5-7.5, และ < 500C ตามลำดับ เมื่อมาพิจารณาที่ substrate specificity พบว่า maltose และ p-nitrophenyl α-D-glucoside (PNPG) เป็นสารตั้งต้นที่เหมาะสมที่สุด |
| บรรณานุกรม | : |
จันทร์เพ็ญ จันทร์เจ้า . (2554). การทำโคลนนิ่ง การแสดงออกและการสกัดบริสุทธิ์ของแอลฟากลูโคซิเดสชนิดที่ 3 ของผึ้งโพรง (Apis cerana).
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย. จันทร์เพ็ญ จันทร์เจ้า . 2554. "การทำโคลนนิ่ง การแสดงออกและการสกัดบริสุทธิ์ของแอลฟากลูโคซิเดสชนิดที่ 3 ของผึ้งโพรง (Apis cerana)".
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย. จันทร์เพ็ญ จันทร์เจ้า . "การทำโคลนนิ่ง การแสดงออกและการสกัดบริสุทธิ์ของแอลฟากลูโคซิเดสชนิดที่ 3 ของผึ้งโพรง (Apis cerana)."
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย, 2554. Print. จันทร์เพ็ญ จันทร์เจ้า . การทำโคลนนิ่ง การแสดงออกและการสกัดบริสุทธิ์ของแอลฟากลูโคซิเดสชนิดที่ 3 ของผึ้งโพรง (Apis cerana). กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย; 2554.
|
