ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การตรวจและศึกษาคุณสมบัติของแบคเทอริโอเฟจที่ทำลาย Lactococcus lactis subsp. lactis TFF221 ซึ่งสามารถสร้างไนซินและมีศักยภาพเป็นหัวเชื้อในอาหารหมักของไทย

หน่วยงาน สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การตรวจและศึกษาคุณสมบัติของแบคเทอริโอเฟจที่ทำลาย Lactococcus lactis subsp. lactis TFF221 ซึ่งสามารถสร้างไนซินและมีศักยภาพเป็นหัวเชื้อในอาหารหมักของไทย
นักวิจัย : ปาริชาติ พุ่มขจร
คำค้น : Bacteriophage , Lactococcus lactis , starter culture , หัวเชื้อ , แบคเทอริโอเฟจ
หน่วยงาน : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2554
อ้างอิง : http://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=MRG5280133 , http://research.trf.or.th/node/5005
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

แบคเทอริโอเฟจ TFF221 แยกได้จากกุ้งจ่อมและสามารถทำลาย Lactococus lactis subsp. lactis TFF221 ซึ่งสร้างไนซินได้ เมื่อนำแบคเทอริโอเฟจไปเลี้ยงกับแบคทีเรียที่เป็นโฮสต์จะทำให้เกิด plaque ที่มีลักษณะกลม-ใสแสดงว่าเป็นไลติกเฟจ เมื่อศึกษาสารพันธุกรรมของ แบคเทอริโอเฟจโดยการตัดด้วยเอนไซม์ตัดจำเพาะ พบว่าเป็น double-stranded DNA มีขนาดประมาณ 65 กิโลเบส จากการศึกษารูปร่างของแบคเทอริโอเฟจด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเลค ตรอนแบบส่องผ่าน พบว่าส่วนหัวมีรูปร่างหลายเหลี่ยม มีหางยืด-หดได้ ที่บริเวณปลายหางมี baseplate และน่าจะจัดอยู่ใน Myoviridae family เมื่อศึกษาโปรตีนโครงสร้างหลักของแบคเทอริโอเฟจโดยวิธี SDS-PAGE พบว่าประกอบด้วยโปรตีน 5 ชนิดซึ่งมีมวลโมเลกุลประมาณ 45.3, 39.8, 26.8, 16.5 และ 8.9 กิโลดาลตัน จากกราฟการเจริญของแบคเทอริโอเฟจพบว่ามี latent period เท่ากับ 30 นาที burst period เท่ากับ 120 นาที และ burst size เท่ากับ 60 pfu/เซลล์ที่ติดเชื้อ แบคเทอริโอเฟจมีความจำเพาะอย่างมากต่อแบคทีเรียที่เป็นโฮสต์ เนื่องจากไม่สามารถทำลายแลคติกแอสิดแบคทีเรียชนิดอื่นที่นำมาทดสอบ แบคเทอริโอเฟจทนต่อค่า pH ในช่วงกว้างตั้งแต่ 4-10 ที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ทนความร้อนที่อุณหภูมิ 70 องศาเซลเซียสเป็นเวลาอย่างน้อย 3 นาที และทนต่อสารละลายโซเดียมคลอไรด์ (NaCl) ที่ความเข้มข้น 1-5% ได้ดีกว่าที่ความเข้มข้น 10% จากการติดตาม L. lactis subsp. lactis TFF221-GFP ที่ใช้เป็นหัวเชื้อและแบคเทอริโอเฟจ TFF221 ในอาหารหมักพบว่า จำนวนของ L. lactis subsp. lactis TFF221-GFP ที่เติมลงไปในอาหารลดลงอย่างมากเมื่อมีแบคเทอริโอเฟจอยู่ในอาหาร ข้อมูลที่ได้จากการตรวจพบและศึกษาคุณสมบัติของแบคเทอริโอเฟจในครั้งนี้ น่าจะสามารถนำไปประยุกต์ใช้เพื่อพัฒนาวีธีการหมักอาหารแบบใช้หัวเชื้อ A lytic bacteriophage TFF221, specific for nisin-producing L. lactis subsp. lactis TFF221, was first isolated from kung-jom, a Thai traditional fermented shrimp paste. The plaques were clear and round-shaped on the lawn of bacteria, indicating its lytic activity. Restriction analysis indicated that genome of phage TFF221 was double-stranded DNA with an approximate size of 65 kb. Transmission electron microscopy revealed that it had an icosahedral head with a contractile tail and a baseplate, and might be tentatively classified as a member of the Myoviridae family. Structural protein profile of phage TFF221 by SDS-PAGE showed five bands with molecular masses estimated at 45.3, 39.8, 26.8, 16.5, and 8.9 kDa. One-step growth experiment of its lytic activity appeared latent and burst periods of 30 and 120 min, respectively, with a burst size of about 60 pfu/infected cell. The phage was highly specific to its host. None of the tested LAB strains was sensitive to phage TFF221. Phage was stable over a wide pH range of 4-10 at 30C for 1 h, and survived after heating at 70C for at least 3 min. Phage had more survivals in 1-5% of NaCl than in 10% of NaCl. Kinetic monitoring of L. lactis subsp. lactis TFF221-GFP starter, which was containing pN014-GFP and had a fluorescent ability, and phage TFF221 in food model demonstrated the considerable decrease in the number of the starter in the presence of phage. Knowledge of these basic properties of this phage might be important for the development of using starter fermentation.

บรรณานุกรม :
ปาริชาติ พุ่มขจร . (2554). การตรวจและศึกษาคุณสมบัติของแบคเทอริโอเฟจที่ทำลาย Lactococcus lactis subsp. lactis TFF221 ซึ่งสามารถสร้างไนซินและมีศักยภาพเป็นหัวเชื้อในอาหารหมักของไทย.
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
ปาริชาติ พุ่มขจร . 2554. "การตรวจและศึกษาคุณสมบัติของแบคเทอริโอเฟจที่ทำลาย Lactococcus lactis subsp. lactis TFF221 ซึ่งสามารถสร้างไนซินและมีศักยภาพเป็นหัวเชื้อในอาหารหมักของไทย".
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
ปาริชาติ พุ่มขจร . "การตรวจและศึกษาคุณสมบัติของแบคเทอริโอเฟจที่ทำลาย Lactococcus lactis subsp. lactis TFF221 ซึ่งสามารถสร้างไนซินและมีศักยภาพเป็นหัวเชื้อในอาหารหมักของไทย."
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย, 2554. Print.
ปาริชาติ พุ่มขจร . การตรวจและศึกษาคุณสมบัติของแบคเทอริโอเฟจที่ทำลาย Lactococcus lactis subsp. lactis TFF221 ซึ่งสามารถสร้างไนซินและมีศักยภาพเป็นหัวเชื้อในอาหารหมักของไทย. กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย; 2554.