การควบคุมการแสดงของยีนที่ระดับ epigenetic หมายถึงการควบคุมที่ทำให้การแสดงออกของยีนเปลี่ยนแปลงไป โดยไม่เกิดความบกพร่องของยีน แต่มีการควบคุมบางประการที่ทำให้ยีนนั้นมีการแสดงออกที่ต่างไปจากเดิม ซึ่งมักเกิดจากการที่ดีเอ็นเอและโปรตีนฮีสโตนถูกเติมด้วยหมู่ฟังก์ชันต่างๆ เช่น หมู่เมทิลหรืออะเซทิล นอกจากนี้การเปลี่ยนแปลงการแสดงออกของยีนอย่างรวดเร็วนั้นสามารถส่งผลให้สิ่งมีชีวิตสามารถปรับตัวให้ทนต่อสภาวะเครียดจากสิ่งแวดล้อมภายนอกได้ อย่างไรก็ดีองค์ความรู้เกี่ยวกับกระบวนการ epigenetic นั้นยังไม่สมบูรณ์ ยังมีการค้นพบโปรตีนชนิดใหม่ๆ ซึ่งทำหน้าที่ในกระบวนการนี้อยู่เสมอ ดังนั้นวัตถุประสงค์ของโครงการวิจัยนี้ คือ การศึกษากระบวนการควบคุมการแสดงของยีนที่ระดับ epigenetic ในสาหร่ายเซลล์เดียว Chlamydomonas reinhardtii โดยทำการสร้างสาหร่ายที่มีการแสดงออกของยีนต้านทานต่อยา paromomycin (ParA) จากนั้นใช้สายพันธุ์ ParA ในการทำการกลายพันธุ์แบบสุ่มและทำการคัดเลือกสาหร่ายที่ไม่มีการแสดงออกของยีนต้านทานต่อยา paromomycin (ParS) จากการคัดเลือกพบว่ามีสาหร่าย ParS ทั้งสิ้น 37 สายพันธุ์ ซึ่งในขณะนี้กำลังทำการศึกษายีนที่ได้รับการกลายพันธุ์รวมถึงลักษณะอื่นๆ ในสาหร่ายเหล่านี้ นอกจากนี้ได้ทำการศึกษาโปรตีนที่มีการแสดงออกแตกต่างกันภายใต้สภาวะเครียดจากความเค็มโดยเทคนิค 2-DE และ LC/MS-MS mass spectrometry ทั้งนี้ผู้วิจัยพบโปรตีนที่มีการแสดงออกแตกต่างกันในสาหร่ายที่เลี้ยงในสภาวะที่มีเกลือเป็นระยะเวลาสั้นและระยะเวลานาน Epigenetics is the changes of gene expression without any alteration of the underlying DNA sequences. These changes of gene expression come about by the modifications of DNA and histone proteins by addition of various functional groups such as methyl or acetyl groups. Epigenetics allows rapid alterations of gene expression under various environmental stresses. However, the knowledge of mechanisms involved in epigenetic regulation is far from being complete. New components implicated in epigenetic regulation are yet to be discovered. The aim of this research project is to understand epigenetic regulation in Chlamydomonas reinhardtii. Transgenic C. reinhardtii actively expressing paromomycin resistant gene were generated (ParA). The ParA lines were used as a background for random insertional mutagenesis and screened for silenced version of the paromomycin resistant gene (ParS). Thirty seven ParS lines were isolated from the screen. These candidate mutants are currently being characterized for their insertion as well as the underlying mutated genes. In addition, differential protein expression under salinity stress has been studied by 2-dimensional electrophoresis followed by LC/MS-MS mass spectrometry. The differential protein profiles were observed in the cells treated with short-term and long-term response to salinity stress.