วัณโรคเป็นโรคที่มีความสำคัญในประเทศไทย และประเทศทั่วโลก รายงานขององค์การอนามัยโลกมีผู้เสียชีวิตจากโรคนี้เป็นจำนวนถึง 2 ล้านคนในแต่ละปี การแพร่ระบาดของวัณโรคร่วมกับโรคภูมิคุ้มกันบกพร่อง และการปรากฏของวัณโรคดื้อยา ทำให้โรคนี้เป็นปัญหาใหญ่ในการบริการสาธารณะสุข และทำให้สถานการณ์ของโรคนี้เลวร้ายมากขึ้น การสังเคราะห์ผนังเซลล์ของแบคทีเรียเป็นเป้าหมายที่สำคัญในการค้นคว้ายาขนานใหม่แบคทีเรียอื่น ได้มีรายงานว่า การ cyclopropanation ที่ตำแหน่ง proximal มีผลทำให้ fluidity ของผนังเซลล์ลดลง เอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการเปลี่ยนแปลงนี้คือ cyclopropane mycolic acid synthase 2 ( CMA-2 ) โครงการนี้ได้ clone และแสดงออกของเอนไซม์ CMA-2 ใน E.coli โดยเพิ่มจำนวนยีน cma2 จากโครโมโซมของเชื้อวัณโรค และตรวจสอบเพื่อยืนยันว่าเป็นยีนที่ทำให้เกิดการ cyclopropantion โดยนำเข้าสู่ M.smegmatis ซึ่งในธรรมชาติไม่มี cyclopropane ring ใน mycolic acid ส่วนของ cyctopropane mycolic acid จะแยกออกจาก unstaturated mycolic acids ได้บน thin layer chromatography ทำให้ตรวจสอบได้ จากนั้นจึงนำยีน cma2 นี้เข้าไปแสดงออกใน E.coli และทดสอบสภาวะที่เหมาะสมในการแสดงออก และทำให้โปรตีนบริสุทธิ์ได้ฉีดโปรตีน CMA-2 ที่สกัดแล้วเข้าสู่กระต่ายเพื่อให้ได้แอนติบอดีต่อโปรตีนนี้ พบว่าแอนติบอดีมีความจำเพาะต่อโปรตีน CMA-2 ในเชื้อวัณโรค แต่ไม่ทำปฏิกิริยากับโปรตีนของ M.smegmatis เอนไซม์นี้น่าจะเป็นประโยชน์ในการพัฒนายาขนานใหม่ในอนาคต และ/หรือมีประโยชน์ในการจำแนกเชื้อ mycobacterium Tuberculosis is an important disease in Thailand and worldwide. World health organization reported 2 million people die from this curable disease each year. The breakdown in health services, the spread of HIV/AIDS and the emergence of multidrug-resistant TB are contributing to the worsening impact of this disease. Bacterial cell-well biosynthesis is a proven target new antibacterial drugs. A improtant drug target in mycobacterial cell wall is mycolic acids which is distinct from other bacteria. Previous report revealed effect of the proximal cyclopropanation on decreasing fluidity of the cell well. Cyclopropane mycolic acid synthase 2 (CMA-2) is a modifying enzyme involved in the mycolic acid synthesis process. In the project, we cloned and expressed the CMA-2 enzyme in E.coli. The amplified cma 2 gene from M.tuberculosis chromosomal DNA was verified the function by introducing into Mycobacterium smegmatis which originally did not contained cyclopropane ring in its mycolic. he mycolic acids were extraced and isolated by thin layer chromatography to detect the cyclopropane mycolic acid in M.smegmatis carrying cma-2. The cma-2 gene was then cloned into the E.coli expression plasmids. CMA-2 enzyme was purified and used to immunize a rabbit to obtain anti-CMA-2. The anti-CMA-2 was comfirmed for the specificity to the crude extract of M.tuberculosis but no cross-reaction with that of M.smegmatis was deteced. The CMA-2 enzyme should be useful for new mycobacterial drug developing in the future and/or mycobaterial classification.