ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การถ่ายยีนไคติเนสเข้าสู่ข้าวโพดหวานสายพันธุ์แท้

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การถ่ายยีนไคติเนสเข้าสู่ข้าวโพดหวานสายพันธุ์แท้
นักวิจัย : ปิยะพงษ์ เอื้อจิระพงษ์พันธ์
คำค้น : -
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2547
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1162547000292
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

เอ็มบริโออ่อนข้าวโพดหวานสายพันธุ์แท้ Ksei 14004 และ SSWI 114 สามารถชักนำให้เจริญเป็นแคลลัสชนิด compact callus ที่มีลักษณะของเนื้อเยื่อเกาะกันอย่างแน่น มีสีเหลืองบนอาหารสังเคราะห์สูตร N6 ที่เติมสารควบคุมการเจริญเติบโต 2,4-D ความเข้มข้น 2 มิลลิกรัมต่อลิตรควบคู่กับ NAA ความเข้มข้น 0.5 มิลลิกรัมต่อลิตร และเมื่อทดสอบหาระดับความเข้มข้นของสารคัดเลือก พบว่าสารกำจัดวัชพืชไบอะลาฟอสและสารปฏิชีวนะไฮโกรมัยซินที่ความเข้มข้น3 มิลลิกรัมต่อลิตร เป็นความเข้มข้นที่เหมาะสมสำหรับใช้ในการคัดเลือกเนื้อเยื่อข้าวโพดที่ได้รับการถ่ายยีน จากการถ่ายยีนไคติเนส (~ichitinase ~i gene) เข้าสู่เอ็มบริโออ่อนของข้าวโพดหวานสายพันธุ์ Ksei 14004 ด้วยเครื่องยิงอนุภาคและอะโกรแบคทีเรียม ในการถ่ายยีนด้วยเครื่องยิงอนุภาคจะใช้พลาสมิด pAHG11 ที่ประกอบด้วยยีนไคติเนสและยีน ~iphosphinothricinacetyltransferase~i (~ibar~i gene) เป็นยีนคัดเลือก โดยทำการยิงที่สภาวะสูญญากาศ25 นิ้วปรอท ใช้แรงดันก๊าซฮีเลียม 1,100 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว และวางเนื้อเยื่อข้าวโพดที่ระยะการยิง 6 เซนติเมตร ภายหลังจากการคัดเลือกเป็นเวลา 4 เดือน จะมีเนื้อเยื่อข้าวโพดที่แสดงลักษณะการต้านทานต่อสารกำจัดวัชพืชไบอะลาฟอส คิดเป็นร้อยละ 2.17 เนื่อนำเนื้อเยื่อข้าวโพดที่ผ่านการคัดเลือกมาวิเคราะห์ด้วยวิธีพีซีอาร์และวิธี Southern blot hybridizationสามารถตรวจพบยีนไคติเนส และยีน ~ibar~i สำหรับการถ่ายยีนโดยใช้อะโกรแบคทีเรียมสายพันธุ์EHA105 ที่มีพลาสมิด pChase20 ประกอบด้วยยีนไคติเนสและยีน ~ihygromycin phosphotransferase~i(~ihpt~i gene) เป็นยีนคัดเลือก ถ่ายเข้าสู่เอ็มบริโออ่อนอายุ 3 วัน หลังจากทำการคัดเลือกพบว่าสามารถคัดเลือกเนื้อเยื่อที่แสดงลักษณะการต้านทานต่อสารปฏิชีวนะไฮโกรมัยซินคิดเป็นร้อยละ 1.89 เนื่องจากประสิทธิภาพของการถ่ายยีนของวิธีการนี้ยังต่ำมาก ดังนั้นจึงควรมีการปรับปรุงวิธีการถ่ายยีนและขั้นตอนในการคัดเลือกเนื้อเยื่อต่อไปในอนาคต

บรรณานุกรม :
ปิยะพงษ์ เอื้อจิระพงษ์พันธ์ . (2547). การถ่ายยีนไคติเนสเข้าสู่ข้าวโพดหวานสายพันธุ์แท้.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
ปิยะพงษ์ เอื้อจิระพงษ์พันธ์ . 2547. "การถ่ายยีนไคติเนสเข้าสู่ข้าวโพดหวานสายพันธุ์แท้".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
ปิยะพงษ์ เอื้อจิระพงษ์พันธ์ . "การถ่ายยีนไคติเนสเข้าสู่ข้าวโพดหวานสายพันธุ์แท้."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2547. Print.
ปิยะพงษ์ เอื้อจิระพงษ์พันธ์ . การถ่ายยีนไคติเนสเข้าสู่ข้าวโพดหวานสายพันธุ์แท้. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2547.