| ชื่อเรื่อง | : | การถ่ายยีนไคติเนสเข้าสู่ข้าวโพดหวานสายพันธุ์แท้ |
| นักวิจัย | : | ปิยะพงษ์ เอื้อจิระพงษ์พันธ์ |
| คำค้น | : | - |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2547 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1162547000292 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | เอ็มบริโออ่อนข้าวโพดหวานสายพันธุ์แท้ Ksei 14004 และ SSWI 114 สามารถชักนำให้เจริญเป็นแคลลัสชนิด compact callus ที่มีลักษณะของเนื้อเยื่อเกาะกันอย่างแน่น มีสีเหลืองบนอาหารสังเคราะห์สูตร N6 ที่เติมสารควบคุมการเจริญเติบโต 2,4-D ความเข้มข้น 2 มิลลิกรัมต่อลิตรควบคู่กับ NAA ความเข้มข้น 0.5 มิลลิกรัมต่อลิตร และเมื่อทดสอบหาระดับความเข้มข้นของสารคัดเลือก พบว่าสารกำจัดวัชพืชไบอะลาฟอสและสารปฏิชีวนะไฮโกรมัยซินที่ความเข้มข้น3 มิลลิกรัมต่อลิตร เป็นความเข้มข้นที่เหมาะสมสำหรับใช้ในการคัดเลือกเนื้อเยื่อข้าวโพดที่ได้รับการถ่ายยีน จากการถ่ายยีนไคติเนส (~ichitinase ~i gene) เข้าสู่เอ็มบริโออ่อนของข้าวโพดหวานสายพันธุ์ Ksei 14004 ด้วยเครื่องยิงอนุภาคและอะโกรแบคทีเรียม ในการถ่ายยีนด้วยเครื่องยิงอนุภาคจะใช้พลาสมิด pAHG11 ที่ประกอบด้วยยีนไคติเนสและยีน ~iphosphinothricinacetyltransferase~i (~ibar~i gene) เป็นยีนคัดเลือก โดยทำการยิงที่สภาวะสูญญากาศ25 นิ้วปรอท ใช้แรงดันก๊าซฮีเลียม 1,100 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว และวางเนื้อเยื่อข้าวโพดที่ระยะการยิง 6 เซนติเมตร ภายหลังจากการคัดเลือกเป็นเวลา 4 เดือน จะมีเนื้อเยื่อข้าวโพดที่แสดงลักษณะการต้านทานต่อสารกำจัดวัชพืชไบอะลาฟอส คิดเป็นร้อยละ 2.17 เนื่อนำเนื้อเยื่อข้าวโพดที่ผ่านการคัดเลือกมาวิเคราะห์ด้วยวิธีพีซีอาร์และวิธี Southern blot hybridizationสามารถตรวจพบยีนไคติเนส และยีน ~ibar~i สำหรับการถ่ายยีนโดยใช้อะโกรแบคทีเรียมสายพันธุ์EHA105 ที่มีพลาสมิด pChase20 ประกอบด้วยยีนไคติเนสและยีน ~ihygromycin phosphotransferase~i(~ihpt~i gene) เป็นยีนคัดเลือก ถ่ายเข้าสู่เอ็มบริโออ่อนอายุ 3 วัน หลังจากทำการคัดเลือกพบว่าสามารถคัดเลือกเนื้อเยื่อที่แสดงลักษณะการต้านทานต่อสารปฏิชีวนะไฮโกรมัยซินคิดเป็นร้อยละ 1.89 เนื่องจากประสิทธิภาพของการถ่ายยีนของวิธีการนี้ยังต่ำมาก ดังนั้นจึงควรมีการปรับปรุงวิธีการถ่ายยีนและขั้นตอนในการคัดเลือกเนื้อเยื่อต่อไปในอนาคต |
| บรรณานุกรม | : |
ปิยะพงษ์ เอื้อจิระพงษ์พันธ์ . (2547). การถ่ายยีนไคติเนสเข้าสู่ข้าวโพดหวานสายพันธุ์แท้.
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. ปิยะพงษ์ เอื้อจิระพงษ์พันธ์ . 2547. "การถ่ายยีนไคติเนสเข้าสู่ข้าวโพดหวานสายพันธุ์แท้".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. ปิยะพงษ์ เอื้อจิระพงษ์พันธ์ . "การถ่ายยีนไคติเนสเข้าสู่ข้าวโพดหวานสายพันธุ์แท้."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2547. Print. ปิยะพงษ์ เอื้อจิระพงษ์พันธ์ . การถ่ายยีนไคติเนสเข้าสู่ข้าวโพดหวานสายพันธุ์แท้. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2547.
|
