| ชื่อเรื่อง | : | เอนไซม์เปอร์ออกซิเดสในใบยางพารา |
| นักวิจัย | : | พัชรากร รัตนภูมี |
| คำค้น | : | - |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2542 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=58456 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | การศึกษานี้ได้แยกเอนไซม์เปอร์ออกซิเดส ซึ่งเร่งปฏิกิริยาการสลายของ H(,2)O(,2) ให้กลายเป็น H(,2)O พร้อมทั้งออกซิไดส์ สารที่เป็นสับสเตรท จากใบยางพาราพันธุ์ RRIM 600 ~i(Hevea brasiliensis)~i ให้บริสุทธิ์โดยการตกตะกอนโปรตีนด้วยเกลือแอมโมเนียมซัลเฟต ตามด้วยคอลัมน์โครมาโทรกราฟีแบบต่าง ๆ โดยใช้ DEAE-Sephacel, Sephadex G-75 และ Con A-Sepharose ตามลำดับ เอนไซม์เปอร์ออกซิเดสที่แยกได้มีความบริสุทธิ์เพิ่มขึ้นถึง 122 เท่าของเอนไซม์สกัดในตอนเริ่มต้น โดยมีความว่องไวจำเพาะเพิ่มขึ้นจาก 9.5 เป็น 1,163 (+,m)mole/min/mg protein เมื่อนำเปอร์ออกซิเดสที่แยกได้มาตรวจสอบความบริสุทธิ์โดยโพลีอะคริลาไมด์เจล อิเล็กโทรฟอรีซิสในสภาพธรรมชาติพบแถบโปรตีนและความว่องไว 3 แถบ ส่วนโพลีอะคริลาไมด์เจล อิเล็กโทรฟอรีซิสแบบมีเอสดีเอส พบแถบโปรตีนของเปอร์ออกซิเดส 2 แถบ มีน้ำหนักโมเลกุลขนาด 85,000 และ 120,000 ดาลตัน น้ำหนักโมเลกุลโดยวิธีเจลฟิลเตรชัน มีขนาด 204,000 ดาลตัน เมื่อทำไอโซอิเล็กทริกโฟกัสซิ่งของเปอร์ออกซิเดสที่บริสุทธิ์แล้วพบแถบโปรตีนและความว่องไว ของเปอร์ออกซิเดสเพียง 1 แถบ มีลักษณะเป็น acidic โดยมีค่า pI 3.6 เปอร์ออกซิเดสที่แยก ได้มีลักษณะเป็นไกลโคโปรตีนซึ่งย้อมติดด้วยสีอัลเซียนบลูและฟุกชิน-ซัลไฟต์ และจากการศึกษา การดูดกลืนแสงในช่วง UV และ visible พบว่ามี 1 Soret peak ที่ 403 นาโนเมตร และมี อัตราส่วนของการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 403 ต่อ 277 เท่ากับ 0.938 แสดงว่ามีหมู่ heme อยู่ในโมเลกุลของเปอร์ออกซิเดสจากใบยางพารา การศึกษาสมบัติของเปอร์ออกซิเดสที่แยกได้จากใบยางพารา พบว่าสามารถเร่งปฏิกิริยา ได้ดีที่ pH 5.5 และเร่งได้ดีขึ้นเมื่ออุณหภูมิสูงขึ้นจนกระทั่งที่อุณหภูมิสูงถึง 60-70 องศาเซลเซียส สามารถเก็บเปอร์ออกซิเดสในรูปของสารละลายไว้ที่ -20 และ 4 องศาเซลเซียส ได้เป็นเวลา 3 เดือน โดยที่ความว่องไวไม่ลดลงเปอร์ออกซิเดสมีความจำเพาะต่อ 0-dianisidine มากกว่า ABTS [2,2-azino-bis(3-ethyl-benzthiazoline-6-sulphonic acid)] และ pyrogallol เพราะมีค่า K(,m) น้อยที่สุด คือ 0-dianisidine น้อยกว่า ABTS และ pyrogallol โดยมีค่าเท่ากับ 0.22 mM, 3.03 mM, 6.60 mM ตามลำดับ เมื่อศึกษาจลนศาสตร์ ของเปอร์ออกซิเดสพบค่า K(,m) ต่อ 0-dianisidine และ H(,2)O(,2) เท่ากับ 0.22 mM และ 2.56 mM ตามลำดับ สารต่าง ๆ ที่มีผลต่อความว่องไว เช่น CaCl(,2) ที่ความเข้มข้น 200 mM, MgCl(,2), EDTA ที่ความเข้มข้น 50 mM และ SDS ที่ความเข้มข้น 0.01 mM กระตุ้นความว่องไว ของเปอร์ออกซิเดสได้สูงสุดโดยเพิ่มขึ้น 120, 50, 25, 30 % ตามลำดับ ในขณะที่ KCN, NaN(,3), DTT, p-CMB ที่ความเข้มข้น 1 mM, 100 mM, 10 mM, 100 mM ตามลำดับ สามารถยับยั้งความ ว่องไวของเปอร์ออกซิเดสได้ 100 % |
| บรรณานุกรม | : |
พัชรากร รัตนภูมี . (2542). เอนไซม์เปอร์ออกซิเดสในใบยางพารา.
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. พัชรากร รัตนภูมี . 2542. "เอนไซม์เปอร์ออกซิเดสในใบยางพารา".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. พัชรากร รัตนภูมี . "เอนไซม์เปอร์ออกซิเดสในใบยางพารา."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2542. Print. พัชรากร รัตนภูมี . เอนไซม์เปอร์ออกซิเดสในใบยางพารา. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2542.
|
