จากการสำรวจปัญหาของการฉีดวัคซีนเฮโมรายิก เซพติซิเมียชนิดน้ำมัน พบว่าวัวมีการแพ้ถึง 50.8% เมื่อทำการศึกษาองค์ประกอบของวัคซีนเฮโมรายิก เซพติซีเมียชนิดน้ำมัน เพื่อหาส่วนที่เป็นสาเหตุที่ทำให้เกิดการแพ้ โดยวิธี skin test พบว่า montanide ISA 70 ซึ่งเป็น adjuvant ชนิดน้ำมัน (mineral oil) เป็นสาเหตุที่ทำให้เกิดการแพ้ทั้งในวัวและในหนูทดลอง การปรับปรุงวัคซีนเริ่มต้นจากการเปลี่ยนความเข้มข้นของ montanide ISA 70 จาก 70% ไปเป็น 50% และ 30% ตามลำดับ เมื่อทดสอบการแพ้แบบภาวะภูมิไวเกินทัยป์ IV ในหนูทดลองด้วยวิธี skin test พบว่า หลังจากฉีดสารที่ต้องการทดสอบที่ฝ่าเท้า ขาหลังหนูทดลองเป็นเวลา 42 ชั่วโมง montanide ISA 70 ความเข้มข้น 70% ทำให้เกิดการแพ้มากกว่าที่ฉีดด้วย montanide ISA 70 ความเข้มข้น 50% (P<.05) montanide ISA70 ความเข้มข้น 50% ทำให้เกิดการแพ้มากกว่าที่ฉีดด้วย montanide ISA70 ความเข้มข้น 30% (P<.05) และ montanide ISA 70 ความเข้มข้น 30% ไม่ทำให้เกิดการแพ้เมื่อเทียบกับ 0.1% bovine serum albumin (BSA)(P>.05) นอกจากนี้ได้ทดลองเปลี่ยน adjuvant และ montanide ISA 70 ความเข้มข้น 70% เป็นซีรัมที่ได้จากวัวที่ได้รับการฉีดวัคซีนเฮโมรายิก เซพติซิเมียชนิดน้ำมัน, fetal calf serum, docosahexaenoic acid ethyl ester (DNA-EE) emulsion และ linoleic acid ethyl ester (LA-EE) emulsion เมื่อทดสอบการแพ้แบบภาวะภูมิไวเกินทัยป์ IV ในหนูทดลองด้วยวิธี skin test พบว่า หลังจากฉีดสารที่ต้องการทดสอบที่ฝ่าเท้าขาหลังหนูทดลองเป็นเวลา 42 ชั่วโมง สารทั้ง 4 ชนิดไม่ทำให้เกิดการแพ้ (P>.05) เมื่อศึกษาความสามารถในการกระตุ้นภูมิคุ้มกันในหนูทดลอง โดยวัดระดับ แอนติบอดี เป็นค่าแอนติบอดีไตเตอร์โดยวิธี ELISA พบว่าเมื่อกระตุ้น (immunized) หนูทดลองด้วย washed bacteria P. multocida ผสม ซีรัมที่ได้จากวัวที่ได้รับการฉีดวัคซีนเฮโมรายิก เซพติเมียชนิดนำ้มัน หรือ washed bacteria P. multocida ผสม fetal calf serum สามารถชักนำให้เกิดภูมิคุ้มกันโรคได้ ในหนูทดลอง โดยวัดระดับแอนติบอดีไตเตอร์ ได้ผลเป็น 1:40 ส่วนหนูทดลองที่กระตุ้นด้วย washed bacteria P. multocida ผสม docosahexaenoic acid ethyl ester (DHA-EE) emulsion หรือ washed bacteria P. multocida ผสม linoteic acid ethyl ester (LA-EE) emulsion สามารถชักนำให้เกิดภูมิคุ้มกันโรคได้ในหนูทดลองใกล้เคียงกับการใช้ montanide ISA 70 ความเข้มข้น 70% เป็น adjuvant โดยวัดระดับแอนติบอดีไตเตอร์ ได้ผลเป็น 1:160 การทดสอบการสร้างภูมิคุ้มกันในหนูทดลอง ด้วยวิธี active mouse protection test (AMPT) พบว่า เมื่อกระตุ้นหนูทดลองด้วย washed bacteria P. multocida ผสม docosahexaenoic acid ethyl ester (DHA-EE) emulsion, washed bacteria P. multocida ผสม linoleic acid ethyl ester (LA-EE) emulsion หรือ washed bacteria P. multocida ผสม montanide ISA 70 (วัคซีนเฮโมรายิก เซพติซีเมียชนิดน้ำมัน) สามารถชักนำให้เกิดภูมิคุ้มกันโรคได้ในหนูทดลอง แต่เมื่อทดสอบความยาวนานในการคุ้มโรค (120 วัน) พบว่า เมื่อกระตุ้นหนูทดลองด้วย washed bacteria P. multocida ผสม docosahexaenoic acid ethyl ester (DHA-EE) emulsion หรือ washed bacteria P. multocida ผสม linoleic acid ethyl ester (LA-EE) emulsion สามารถชักนำให้เกิดภูมิคุ้มกันโรคที่ยาวนานถึง 120 วัน ได้เพียง 30% ส่วนหนูทดลองที่กระตุ้น ด้วย washed bacteria P. multocida ผสม montanide ISA 70 สามารถชักนำให้เกิดภูมิคุ้มกันยาวนานถึงmontanide ISA 70 สามารถชักนำให้เกิดภูมิคุ้มกันยาวนานถึง 120 วัน ได้เต็ม 100% จากผลการทดลองชี้ให้เห็นว่า ในระยะเวลาประมาณ 4 สัปดาห์ docosahexaenoic acid ethyl ester (DHA-EE) emulsion และ linoleic acid ethyl ester (LA-EE) emulsion สามารถเป็น adjuvant ที่ดี โดยสามารถตรวจระดับแอนติบอดีไตเตอร์ได้ และยังไม่ทำให้เกิดการแพ้หรือการอักเสบ แต่ถ้าต้องการให้สามารถชักนำ ให้เกิดภูมิคุ้มกันที่ยาวนาน อาจต้องมีการปรับปรุงความเข้มข้นของ docosahexaenoic acid ethyl ester (DHA-EE) emulsion และ linoleic acid ethyl ester (LA-EE) emulsion ให้มากขึ้น