เชื้อ avian influenza A virus สายพันธุ์ H5 และ H7 มักทำให้เกิดโรครุนแรงในสัตว์ปีกหลายชนิด นอกจากนี้เชื้อ avian influenza A virus สายพันธุ์ H5 H7 และ H9มีรายงานว่าสามารถติดต่อสู่คนได้อีกด้วย ในงานวิจัยครั้งนี้ได้มีการพัฒนาวิธี one stepmultiplex RT-PCR เพื่อประกอบการตรวจวินิจฉัย avian influenza A virus สายพันธุ์ H5H7 และ H9 ในตัวอย่างที่แยกได้จากสัตว์ปีกที่มีประวัติอาการสงสัยการติดเชื้อในระบบทางเดินหายใจ ชุด primers ที่ได้ทำการออกแบบนั้นให้ผลผลิตขนาดต่างกันดังนี้คือ 157 คู่เบส(H5), 326 คู่เบส (H7) และ 231 คู่เบส (H9) วิธี one step multiplex RT-PCR นี้มีความไวและความจำเพาะสูงเนื่องจากให้ผลลบต่อเชื้อไวรัสที่ทำให้เกิดโรคในระบบทางเดินหายใจที่สำคัญในไก่และในมนุษย์รวมถึงเชื้อ avian influenza A virus สายพันธุ์อื่นๆ ด้วยและความไวของวิธี one step multiplex RT-PCR เมื่อทำการทดสอบแยกปฏิกิริยากันสำหรับH5 H7 และ H9 RNA transcripts คือ 10('3) copies/(+,m)L นอกจากนี้ความไวของวิธีone step multiplex RT-PCR เมื่อทำการทดสอบ H5 H7 และ H9 RNA transcripts ในปฏิกริยาเดียวกันคือ 10('4) copiess/(+,m)L ดังนั้นวิธี one-step multiplex RT-PCR นี้จึงเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพสูงสามารถใช้ในการตรวจวินิจฉัยเชื้อ avian influenza A virusสายพันธุ์ที่สามารถติดต่อสู่คนได้แก่ สายพันธุ์ H5 H7 และ H9 ในตัวอย่างจากสัตว์ปีกได้อย่างรวดเร็วและแม่นยำ ทำให้มีความเหมาะสมที่สำหรับใช้ในการตรวจเพื่อเฝ้าระวังและเป็นสัญญาณเตือนก่อนที่จะมีการแพร่ระบาดไปยังคน