ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การถ่ายยีนเร่งการเจริญเติบโตเข้าสู่ไข่ของปลาดุกอุย (Clariasmacrocephalus) ที่ได้รับการผสมมาแล้วโดยวิธีไมโคอินแจคชัน

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การถ่ายยีนเร่งการเจริญเติบโตเข้าสู่ไข่ของปลาดุกอุย (Clariasmacrocephalus) ที่ได้รับการผสมมาแล้วโดยวิธีไมโคอินแจคชัน
นักวิจัย : สุรินทร บุญนันธนสาร
คำค้น : MICROINJECTION , TRANSGENIC FISH , CATFISH
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2537
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1082537000996
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

การถ่ายยีนเร่งการเจริญเติบโตเข้าสู่ไข่ของปลาดุกอุย (Clarasmacrocephalus Gumther.) ที่ได้รับการผสมแล้ว โดยวิธีไมโครอินแจคชันมี 4 จุดประสงค์ คือ 1) เปรียบเทียบอัตรารอด ระหว่างลูกปลาที่ได้รับการถ่ายยีนส์และกลุ่มควบคุม (กลุ่มที่ไม่ได้รับการถ่ายยีนส์) 2) เปรียบเทียบการเจริญเติบโตระหว่างปลาที่ได้รับการถ่ายยีนส์และกลุ่มควบคุม 3) ตรวจหายีนส์ที่ถ่ายเข้าไปในเลือดปลา และ 4) ตรวจหายีนส์ที่ถ่ายเข่าไปในอวัยวะต่าง ๆ ของปลา เตรียมพลาสมิด pXGH 5 ซึ่งประกอบด้วยส่วนของยีนส์เร่งการเจริญเติบโต (hGH) ต่อกับส่วนของโปรโมเตอร์ (mMT-I) ทำให้พลาสมิดอยู่ในรูปเส้นตรง (Iinearized form) โดยย่อยด้วนเอนไซม์ BamH 1 ไมโครอินเจคชันสารละลายพลาสมิดจำนวน 10('6)Copies ปริมาตร 240 พิโคลิตร เข้าสู่germinal disc ของไข่ปลาดุกอุยที่ได้รับการผสมแล้ว 3 ระยะได้แก่ระยะเซลล์ ระยะ2 เซลล์ และระยะ 4 เซลล์ ที่อุณหภูมิน้ำ 25 องศาเซลเซียสไข่มีอัตราการฟักเท่ากับ 25.91('+)(,-)23.00%, 29.71('+)(,-)29.45% และ30.94('+)(,-)30.22% ตามลำดับ ซึ่งไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม 40.67('+)(,-)20.76% พบว่าอัตราการฟักของไข่ปลากลุ่มที่ได้รับการถ่ายยีนส์ทั้ง 3 ระยะต่ำกว่ากลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05) อัตรารอดที่อายุ 1 เดือน ของลูกปลาที่ได้รับการถ่ายยีนส์ที่ระยะ 1 เซลล์ ระยะ 2 เซลล์ ระยะ 4 เซลและกลุ่มควบคุมมีค่าเท่ากับ 52.02 ('+)(,-)19.81%, 46.67('+)(,-)30.49%,35.51('+)(,-)34.13% และ 53.61('+)(,-)22.30 % ตามลำดับซึ่งไม่แตกต่างอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ เปรียบเทียบการเจริญเติบโตปลากลุ่มที่ได้รับการถ่ายยีนส์กับกลุ่มควบคุมในแม่ปลาเดียวกัน โดยเลี้ยงปลาในกระชังให้มีความหนาแน่นเท่ากันพบว่า ปลาที่ได้รับการถ่ายยีนส์ที่ระยะ 1 เซลล์ และระยะ 2 เซลล์ มีการเจริญเติบโตสูงกว่ากลุ่มควบคุม ส่วนปลาที่ได้รับการถ่ายยีนส์ที่ระยะ 4 มีการเจริญเติบโตไม่แตกต่างจากกลุ่มควบคุม อย่างไรก็ตามมีเพียงอัตราการเจริญเติบโตของกลุ่มที่ได้รับการถ่ายยีนส์ที่ระยะ 1 เซลล์สูงกว่ากลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05) ทำการตรวจหายีนส์ที่ถ่ายเข้าไปในเลือดปลา โดยใช้เทคนิคPolymerase Chain Reaction (PCR) เพื่อเพิ่มปริมาณชิ้นส่วนของดีเอ็นเอในยีนส์เร่งการเจริญเติบโตของคน ซึ่งมีขนาด 186 คู่เบส ร่วมกับไฮบริไดเซชันพบว่าอัตราของยีนส์ที่ถ่ายเข้าไปเชื่อมกับโครโมโซมของปลาที่ทำการถ่ายยีนส์ที่ระยะ 1 เซลล์ ระยะ 2 เซลล์ และ ระยะ 4 เซลล์ มีค่าเท่ากับ 5.05%(5 ใน 99 ตัวอย่าง), 6.45% (2 ใน 31 ตัวอย่าง) และ 8.45% (1 ใน12 ตัวอย่าง) ตามลำดับ ตรวจหายีนส์ที่ถ่ายเข้าไปในอวัยวะต่าง ๆ ของปลา โดยสกัดดีเอ็นเอและทำ dot blot hybridization พบว่าเกิด mosaic ในแต่ละอวัยวะของปลาและพบที่ทุกระยะของไข่ปลาที่ทำการถ่ายยีนส์ จากการศึกษาครั้งนี้สรุปได้ว่าระยะพัฒนาการของตัวอ่อนปลาดุกอุยที่เหมาะสมต่อการถ่ายยีนส์โดยวิธีไมโครอินเจคชัน คือ ระยะ 1 เซลล์ และ ระยะ 2 เซลล์

บรรณานุกรม :
สุรินทร บุญนันธนสาร . (2537). การถ่ายยีนเร่งการเจริญเติบโตเข้าสู่ไข่ของปลาดุกอุย (Clariasmacrocephalus) ที่ได้รับการผสมมาแล้วโดยวิธีไมโคอินแจคชัน.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
สุรินทร บุญนันธนสาร . 2537. "การถ่ายยีนเร่งการเจริญเติบโตเข้าสู่ไข่ของปลาดุกอุย (Clariasmacrocephalus) ที่ได้รับการผสมมาแล้วโดยวิธีไมโคอินแจคชัน".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
สุรินทร บุญนันธนสาร . "การถ่ายยีนเร่งการเจริญเติบโตเข้าสู่ไข่ของปลาดุกอุย (Clariasmacrocephalus) ที่ได้รับการผสมมาแล้วโดยวิธีไมโคอินแจคชัน."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2537. Print.
สุรินทร บุญนันธนสาร . การถ่ายยีนเร่งการเจริญเติบโตเข้าสู่ไข่ของปลาดุกอุย (Clariasmacrocephalus) ที่ได้รับการผสมมาแล้วโดยวิธีไมโคอินแจคชัน. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2537.