| ชื่อเรื่อง | : | การโคลนยีนจากเชื้อ Pseudomonas pseudomallei สู่ Escherichiacoli และการคัดเลือกโคลนที่แสดงคุณสมบัติสลายเม็ดเลือดแดง |
| นักวิจัย | : | วิสาตรี คงเจริญสุนทร |
| คำค้น | : | CLONING , PSEUDOMONAS PSEUDOMALLEI , HEMOLYSIN-EXPRESSINGESCHERICHIA COLI |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2536 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1082536000171 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | Pseudomonas pseudomallei เป็นแบคทีเรียแกรมลบที่เป็นสาเหตุของโรค melioidosis คุณสมบัติที่คาดว่าน่าจะมีบทบาทในการก่อโรค ได้แก่surface antigens และ extracellular substances พวก exotoxin,protease และ hemolysin เพื่อที่จะศึกษา hemolysin ของ P.pseudomallei ได้ใช้ recombinantDNA technique โคลนดีเอ็นเอของ P.pseudomallei สายพันธุ์ K1/88 เข้าสู่E. coli JM 109 โดยตัดดีเอ็นเอของ P. pseudomallei ด้วย PstI อย่างไม่สมบูรณ์แล้วนำมา ligate กับพลาสมิด pUC18 ซึ่งถูกตัดด้วย PstI และลูกdephosphorylated จากนั้น transform ligation mixture สู่ competentE. coli JM109 แล้วเพาะเลี้ยงบน amplicillin agar ที่มี X-gal เลือกโคโลนีสีขาว ซึ่งเป็นโคโลนีของ transformants ที่มี recombinant plasmidsนำ transformants ไปทดสอบหา hemolytic activity ด้วย cellophaneplate technique พบ transformants ที่ให้ hemolytic activity 3 โคลนซึ่งมี recombination plasmids ที่ให้ชื่อว่า pWC3, pWC7 และ pWD1 โดยมีinserted DNA ขนาดประมาณ 0.9, 0.9 และ 5.6 kb ตามลำดับ เมื่อใช้ insertedDNA ทั้งสามเป็น probe ในการไฮบริไดซ์กับ Southern blots พบว่า inserted DNAสามารถไฮบริไดซ์กับ chromosomal DNA fragment ของ P. pseudomalleiที่ตัดด้วย PstI ที่ตำแหน่งเดียวกับ inserted DNA ยกเว้นกรณี inserted DNAfragment ขนาด 400 bp ของ pWC7 ที่ไฮบริไดซ์เป็น smear กับ DNA ที่มีน้ำหนักโมเลกุลสูง นอกจากนี้ยังพบว่า inserted DNA ของทั้ง 3 โคลน ไม่มีhomology กัน |
| บรรณานุกรม | : |
วิสาตรี คงเจริญสุนทร . (2536). การโคลนยีนจากเชื้อ Pseudomonas pseudomallei สู่ Escherichiacoli และการคัดเลือกโคลนที่แสดงคุณสมบัติสลายเม็ดเลือดแดง.
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. วิสาตรี คงเจริญสุนทร . 2536. "การโคลนยีนจากเชื้อ Pseudomonas pseudomallei สู่ Escherichiacoli และการคัดเลือกโคลนที่แสดงคุณสมบัติสลายเม็ดเลือดแดง".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. วิสาตรี คงเจริญสุนทร . "การโคลนยีนจากเชื้อ Pseudomonas pseudomallei สู่ Escherichiacoli และการคัดเลือกโคลนที่แสดงคุณสมบัติสลายเม็ดเลือดแดง."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2536. Print. วิสาตรี คงเจริญสุนทร . การโคลนยีนจากเชื้อ Pseudomonas pseudomallei สู่ Escherichiacoli และการคัดเลือกโคลนที่แสดงคุณสมบัติสลายเม็ดเลือดแดง. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2536.
|
